尿液显微镜检，如何换算高低倍视野与微升_学术交流_检验视界

问题

1、两种单位的结果如何转换？

许多情况下仪器会出两种单位的结果，仪器厂家已经依据他们设计好的方案进行了转化，或许不需要换算。

但实验室需要做内部比对，人机比对，性能验证，参考区间确认，或许就需要进行换算了。

具体怎样操作，可能还是一头雾水。不仅是检验人员，连设备开发厂商的团队也不一定搞得很明白。

2、均值与定量单位如何转换？

传统的显微镜报告格式是x-xx个细胞/HPF或x-x个管型/LPF，也很容易换算为均值，根据你计数的某种有形成分总数和视野数，就可以拿到平均值的结果。

各种尿液有形成分仪器报告的方式是xx个细胞/μl或xx个管型/μl，报告单位是微升（1ml=1000μl，1μl=1mm³）。当然厂家或设备软件也许可以帮你转为传统单位，或者两种单位共存。

3、镜检法与仪器法如何转换？

我们还知道，尿沉渣镜检是分为离心镜检和直接镜检的两种模式，而尿液有形成分分析的仪器法，均使用非离心的方法，那么离心镜检法和未离心的仪器法是怎样的关系呢？如何换算的？如果你科室有不同品牌和不同规格的显微镜又该怎么办呢？

回答

1、先从显微镜目镜开始

显微镜一般分为低倍镜、高倍镜和油镜。但是尿液有形成分检查只使用高倍镜和低倍镜。

显微镜目镜放大倍率一般为×10倍。但是显微镜下的视野面积完全不同，这就需要关注其视场数值（这一点大家都不清楚吧）。目前各种显微镜的视场数值是不同的，有18mm，20mm，22mm，25mm，26.5mm等多种不同（图1-图4），具体标识在目镜镜头上，就是“/”后面的那个数值，叫做视场数值，或者简写为FN（Field Number）值。显微镜下看到的圆形的视野面积大小就和这个FN值有关，虽然物镜头上也会标有FN值，但这对视野下面积影响不大。

FN数值的大小是和视野下的面积密切相关的，就像你看到的小范围视野面积和大视野（宽视野）面积是完全不同的。我们都知道圆形的面积公式等于πr²，因此与显微镜下圆的直径和半径有关的。不同FN值的目镜所看到的面积和细胞数量是完全不同的。请看山东省医院沈亚娟老师提供的两幅对比图（图5，图6），标本位置不动，分别用FN=20和26.5的两种目镜观察如下的视野。在FN为26.5的视野下看到更多的东西，例如红箭头所指，在FN为20的视野中没有看到这些东西或不全，说明视野面积完全不对等。

因此要换算高倍视野和低倍视野与μl的关系，首先应该确认你用什么FN值的显微镜目镜。我们国内关于尿沉渣镜检，只规定了所用的物镜头分别为×10和×40，即高倍镜和低倍镜，但是没有规定所用目镜的要求。所以在国内文献中找到相关答案就比较难，只能先参考国外的资料和标准吧。下面三个不同FN值的视野下所看到的视野下面积，和视野下包含的细胞数量完全不同（图7）。

因此在三个不同目镜下，看到的视野面积和其中包含的细胞数量，明显不同。

据了解目前最大视野的目镜FN值为26.5mm，视野下面积为551.27mm²，约为FN18的目镜下面积的2.17倍。

了解不同FN值的显微镜视野，对实验室内人员比对很重要，推荐实验室使用统一FN值的显微镜，如果不一样，则可能导致一些换算问题。

2、尿液标本的离心和制备

我国各类教科书和行业标准要求：取10ml混合均匀的尿液标本，以400g离心力离心5min，弃去上清液液，保留沉渣0.2ml（200ul）。因此尿液标本被浓缩50倍。

取20μl（0.02ml或）尿液标本滴于载玻片上，再加18mm×18mm的盖片一张（面积为324mm²），确保无溢出，无气泡，覆盖均匀，这样在盖玻片下覆盖了20μl的标本，其平均厚度约0.062mm。如果不加盖玻片是无法达到标本均匀一致的（图8）。

3、换算

下表中表达分别为

LPF：低倍视野

HPF：高倍视野

FN：视场数值

视野直径 =FN值÷目镜放大倍率；

视野半径 =（FN值÷目镜放大倍率）÷2；

视野面积：S=πr²，

盖玻片下覆盖样本厚度或高度（mm）：

体积=面积×高，

高=体积/面积，

因此盖玻片下

标本高度=样本量（mm³）÷盖片面积（mm²）。

每个盖玻片324mm²面积下可以包含多少个低倍视野或高倍视野，很容易算出。

如果将20ul（20mm³）标本平均分布在边长为18mm×18mm的盖玻片下，其总覆盖面积为324mm²，因此标本液面高度约为0.062mm。以此计每个视野下覆盖的标本体积（镜头下视野面积×高度）和还原离心浓缩50倍后的结果，也就是相当于计数未离心浓缩前的样本量，以便和自动尿有形成分分析仪具可比性，见表2。

如果你使用的显微镜FN值为上述表格中的一种，可以参考，如果不是，就需自己计算。可以看出如果使用FN=26.5的目镜，所看到的视野下范围和样本量，是FN=18的目镜的一倍多。

山东省医院检验科沈亚娟教授为我提供的另一张对比图（图9，图10），同一个视野，不同FN的目镜，有一些不同的发现吧，这就是大视野的优势。

讨论

1、同一实验室应该使用相同FN数值的显微镜，以便统一报告结果，增加可比性。

不同FN数值的显微镜目镜，其视野面积下观察到的范围和细胞数量是不同的。

同一个实验室在尿液检验专业领域，无论是在门诊、住院部、急诊或分院区，应该使用相同FN数值的显微镜，以便统一报告结果，增加可比性。在进行人工镜检和仪器测定数量对比时，一定要考虑到FN数值的特点，建立自己实验室的换算方案。公认的镜下血尿红细胞>3个/HPF，其来源已久，当时是在什么条件下做出的，目前无据可考（早年的显微镜FN数值不会超过20）。如果考虑到视场数值最小与最大，其观察量可相差一倍，那么这个RBC数量可能就不是3个/HPF。

2、行业标准中，应增加FN的标准

在国内检验教材、行业标准中，除了规范尿量、离心力、沉渣量和盖玻片的规范外，还应增加视场数值（FN）的标准。

国内专业学术团体应该考虑，或有条件的实验室可以根据自己所用显微镜，视场数值等标准，重新定义镜下血尿或脓尿的标准。

3、重视仪器法与镜检法的对应数值换算

不同厂家及不同品牌的尿液有形成分分析仪，其报告的每微升多少细胞或管型与对应换算而来的高倍/低倍视野的数值，请咨询相关厂商。