“老不听话”的血清磷测值
最近一起上班的生化组操作老师反复跟我提出一件烦恼事件：血清无机磷（P）测值波动异常，以异常升高为主，室内质控校正回去后，进行批量病患标本运行时，又频繁出现与临床诊断不符的异常值。
同时申诉仪器（日立7180全自动生化分析仪）工作状态正常，试剂在有效期内，质控品校准品未更换批次。
科室同时运行的另一台仪器是国产迪瑞600-B，该项目也用同一试剂，却不会出现异常。
接到报案，笔者撸起袖子分析看：
生化结果异常的可能原因有：
「1」 光源灯老化
光源灯老化优先表现在340nm主波长的项目，反应曲线常有明显跳点；
「2」清洗机构滴液，比色杯溢水
清洗机构滴液、比色杯溢水导致的结果异常通常会在不同项目间出现，而且反应曲线会出现断崖式变化；
「3」携带污染等原因
携带污染的特点为第一次测试结果异常，常量复查正常，具有偶发性。
我们检查了清洗用水的质量，欧姆值大于1（如上图2），是合格可用的。经检查，光源灯正常，340nm光量测值为13455，清洗机构无堵塞、无滴液，比色杯表面干净无溢水现象。因此初步判断可能为携带污染导致。
携带污染分为：
「1」样品针携带污染
样品针携带污染为前一高浓度标本影响后一标本；
「2」试剂针携带污染
试剂针携带污染为前一项目试剂针上的残留物影响下一检测项目的反应，其加样特点具有一定的规律，例如特定项目排序时出现试剂针携带污染现象；
「3」比色杯携带污染
搅拌棒、比色杯携带污染为前一项目的产物/中间产物黏附到搅拌棒/比色杯上影响下一检测项目的反应，因其工作特点具有随机性，不容易排查。
样品针携带污染首先被我排除，因为仅有血清磷（P）出现异常，其他项目未见干扰，因此不存在样品针携带污染。试剂加样顺序已多年未改变，所以暂时排除试剂针携带污染的可能。初步怀疑为清洗不彻底导致比色杯携带污染。
首先我查找到一个异常升高的血清磷项目，如下图3，属于标本号255，在第128号反应杯测试，测值为2.59mmol/L。
查找比色杯的使用情况，我咨询了仪器工程师，在其指导下，使用生化仪的比色杯历史功能，打印比色杯使用记录(如下图4)，查找干扰来源。
日立7180生化分析仪打印比色杯使用记录操作路径：
Print---Utility---History of Cuvettes---Print
根据异常结果的标本号(图5，N00255号标本)查找到该P结果异常的标本所用的比色杯为128号比色杯。
然后根据反应时间再找到128号比色杯的前一循环的测试项目为N00249号标本的AST(图6)，且其他P结果异常的标本前一循环的比色杯测试项目均为AST。由此怀疑P结果异常可能是由AST所引起的。
我们使用的血清无机磷（P）试剂属长春迪瑞生产，按自动化分析仪紫外光度法原理,血清中无机磷与钼酸铵作用,生成具有光吸收特征的磷钼酸盐,在单波长340nm 下吸光度(D)与磷含量成正比。血清AST（天门冬氨酸氨基转移酶）由宁波普瑞柏生物技术有限公司生产，采用连续监测法，门冬氨酸和α-酮戊二酸在磷酸缓冲液中与AST作用生成草酰乙酸和L谷氨酸。草酰乙酸在苹果酸脱氢酶作用下生成苹果酸，同时NADH被氧化为NAD+，可在340nm处监测吸光度的下降速率，从而计算AST活性。因AST试剂使用磷酸缓冲液，对无机磷的测定就带来了可能的干扰。
解决方案：
针对此类携带污染的处理方式为：
「1」设置AST项目分析参数中的比色杯清洗（Cell Detergent）为Detergent1&2；
「2」若设置完「1」后还存在比色杯交叉污染现象，则设置AST项目的比色杯特殊清洗；
「3」设置AST对P的试剂针特殊清洗；
我们在采用「1」和「2」的处理方式后，P结果恢复正常（编号8000，反应杯位置是119），是符合临床的1.46mmol/L。
导致携带污染的可能因素主要有：
01 样品针、试剂针、搅拌棒脏污；特氟龙涂层老化，携带率增高；
02 清洗机构清洗针、流路、电磁阀堵塞；小白块老化；水压降低，清洗能力下降；
03 使用非正品清洗剂(酸性or碱性清洗剂)导致清洗能力不足；
04 比色杯脏污、老化、有划痕、变色、黏附率高；
05 比色杯清洗参数设置不良等原因。
