表面抗原的滴度差距巨大,病毒含量相当,原因何在?
质控在控,反应曲线呈现典型的S型,反应效率和K值均无异常,实验是成功的,结果可靠。 这里拓展一下为什么我们要看反应图形与参数。 一个成功的PCR反应,应该是严格遵循DNA半保留复制的原则,那么产物数量Xn应该等于起始模板量X0乘以2n(n为循环数)。 这里呢,讨论的只是理论情况下,最为完美的实验情况下发生的。但实际情况往往实验过程中参杂有其他因素,比如说基质效应,比如酶的活力达不到百分之百,比如反应中存在干扰物等等,都会使得反应不能按照百分之百按照理想情况进行,那么模板就不可能达到2n扩增出来,所以,就引入一个概念,扩增效率。 Xn=X0×(1+En)n 假如,产物的荧光值达到阈值时,循环数是Ct值,那么上面的公式就可以转化为 XCt=X0×(1+En)Ct 经过取对数推导,可以得到循环数和反应斜率K之间的关系 En=10(-1/k)-1
了解了这些,那么在本案例中两个患者表面抗原的滴度相差那么多,而患者血浆中的病毒浓度却相差无几呢? 在我们一般的认知里,表面抗原的滴度高,说明患者体内有乙肝病毒活动和存在复制情况,那么多数情况下,病毒DNA浓度应该也是高的。一定程度上,它跟病毒DNA浓度存在正相关。 但有研究表明,有部分乙肝患者表面抗原滴度很低甚至检测不出来,但是血液或者肝组织中却可以检测到低水平的乙肝DNA复制。临床上把这部分患者称为隐匿性乙肝,这是由于病毒变异导致的。此类乙型肝炎往往容易漏检,也容易被忽视,疾病更容易进展为肝硬化,肝癌,造成不可挽回的损失。 本案例中病例1表面抗原滴度较低,甚至用胶体金检测为阴性。有可能存在隐匿性乙肝的情况,或者患者在进行抗病毒治疗,表面抗原在进行血清学的转换过程中。导致我们看到病例1和病例2虽然表面抗原滴度相差很大,但乙肝DNA相差不大,都属于低水平的复制。 所以,通过此案例,我们仅仅以乙肝表面抗原阳性,乙肝e抗原阴性来判断乙肝病毒有没有复制,是存在漏检一部分乙肝患者的,特别是这种小三阳患者,患者体内可能存在低水平或者高水平的复制,同时还要结合患者肝功能,及肝脏病理指标来判断是否需要抗病毒治疗。