临床实验室荧光原位杂交及质量控制
卫生部北京医院、卫生部临床检验中心——费阳，王治国
摘要：本文为确保适当的和可靠的使用荧光原位杂交（FISH）技术提供了信息。FISH可以用来检测细胞遗传学异常，这是不容易通过标准细胞遗传学显带分析明显检测出的。FISH技术允许快速识别特定基因、位点，或者染色体DNA/RNA序列的缺失、重复和结构错误。FISH评估的区域比PCR研究的区域要明显大，但是比使用标准细胞遗传学进行的可视显微镜检测的区域要小。FISH研究在医学实验室里已经成为一项常规的研究。
关键词：染色体、细胞遗传学、FISH、荧光原位杂交
本文讲述医学遗传学测定、染色体异常识别和基因扩增的荧光原位杂交方法，也包括探针和检测开发、制造、鉴定、验证和确认的建议，仪器要求，质量保证和结果评估。本文意在便利FISH分析的重现性生产和结果的实验室间比较及诊断解释，以及确保诊断的准确性。本文依据商业制造的和实验室建立的FISH探针来进行试验的实验室使用。本文并没有表明与FISH探针制造或者基于FISH技术的体外诊断（IVD）设备相关的问题。但是，制造商可能在本文中发现价值并且更好的了解到他们的产品将怎样由实验室使用。
大约在30年前开发的技术FISH，是一种用于研究染色体结构和功能的有力方法。此方法，最初用于帮助人类基因组计划进行DNA绘图，很快被临床试验和临床研究采用。如今，FISH不仅用于医学遗传学，也用于很多其它领域包括神经科学、进化生物学、微生物学、病理学、毒理学和生殖遗传学。FISH允许研究对传统细胞遗传学分析来说太小而不能识别，但是对于标准DNA测序来说太大而不能检查的遗传学差错。FISH技术包括荧光标记的DNA或者RNA杂交到生物学材料上。此技术提供与探针一致的DNA或者RNA序列的物理位置的可视化并且允许审查基因组特定区域来检测染色体物质的丢失、获得或者重排。在本文中，FISH特指的是DNA探针的使用。
1. FISH的临床应用
在临床服务中，如在生物学研究中，FISH架起了传统细胞遗传学分析和基于DNA测序分子技术之间的桥梁。虽然包含了上百万个DNA碱基对（bp），染色体微缺失和染色体微重复不能由传统方法轻易检测。FISH也提供了一个当中期细胞（染色体只有在这段时期的细胞中可以被直接看到）没出现时，回答临床重要细胞遗传学异常的途径。通常使用血液、骨髓、羊水、绒毛膜绒毛样品、石蜡包埋组织切片、从石蜡块中分解的细胞和其它细胞学准备。
2. FISH试验的开发、确认和验证
一种包含FISH的试验被定义为一种探针的特定的有意的临床使用。也就是说，试验不是由一般的“FISH”技术定义。例如，一种检查8-三体综合征试验的确认是与检查21三体综合征试验的确认是一个分开的过程，尽管事实上基本程序是相似的。
表1提供了新FISH试验的开发、确认和验证的建议过程的概述。尽管带有靶异常的样品可能很难获取，这类样品的最小量应该被包含在每个确认中。
2.1 被测量（分析物）是什么？ 被测量（分析物）的概念在FISH检测中比在大多数其它临床实验室试验中稍有不同。被测量（分析物）是FISH信号图像。每个FISH试验有能力检测多个图像。在最简单的情况下，FISH可以被设计来检测带有0，1，2，3等多个与特定染色体组目标一致的细胞。对于此类被测量（分析物），试验可以基于单个FISH探针。被测量（分析物）也可以是细胞中染色体目标相对位置改变的相关信号图像。此类FISH试验需要至少2个不同FISH探针，每个探针标记上不同的荧光颜色。
2.2 试验是什么？ 个别细胞可能依据FISH信号的数量和/或位置进行分类，但是一个完整的试验通常需要扩展这个过程到一些细胞然后根据比较异常图像细胞数量与参考值形成一个分析结论。参考值可以有一个临床的或者统计学的基础。临床参考可能是例如，以经验为主获取的知识，唐氏综合症孕妇的羊水细胞中至少60%有三个特定位于21号染色体的FISH信号。统计学参考可以是一系列临床不受影响个体标本中特定异常信号图像的频率。
2.3 试验灵敏度和特异性 至少3种水平的灵敏度和特异性应用在FISH测试中：1）探针灵敏度和特异性；2）分析灵敏度和特异性和3）临床灵敏度和特异性（见表2）。
2.4 向实验室引入一个新FISH试验 如果从制造商购买FISH试验成套设备而且已经被批准作为一个IVD设备，紧接着的实验设计，过程优化和确认步骤将被制造商完成。然而，在最初使用试验以前，实验室应该验证试验成套设备会如预期的运行。按照常规规则，验证应该包括至少10个已知待测量状况的标本（见表1）。至少有一个验证标本是已知的异常标本。对设计复杂的试验来说，验证应该包括大量标本，包括已知异常样品。依据实际情况，一个单一异常标本可以被连续稀释来确认试验的定量性能。
IVD设备说明书中描述任何程序的背离被认为是“超出预期使用”而且要求成套设备要按照以下描述重新确认。背离程序可以包括：标本处理指南、孵育时间或温度、标本或实际稀释、忽略过程步骤、探针的添加、cutoff值或者计算cutoff值的方法。
注意在没有被制造商确认的样品类型或者疾病上使用IVD仪器被认为是“标签外”使用而且也要求成套设备被重新确认。如果试验使用的探针没有被批准作为IVD设备，实验室对于试验设计、过程优化、探针性能确认和对于一些试验，发展试验解释使用的参考值（在表1中总结）是有责任的。对于这些探针，实验室也应该知道政府规定可能限制这些探针在临床试验中的使用方式。
1）杂交最优化过程 因素如标本类型，试剂（包括探针）浓度和温度与变性、杂交、和杂交后洗涤时间对于探针信号的强度和非特异性荧光的强度有贡献。对于一些标本类型，预处理步骤如固定或酶分解也有要求。优化是试验建立和确认的第一步。不同的组织类型可能需要分开优化。试验开发和确认的第一步是最优化（见表3）。
2）探针定位，特异性和灵敏度 评估FISH探针的灵敏度和特异性和确认探针瞄准预期染色体区域，通常同时完成。定位只能使用中期染色体制备执行。为了确定探针正确的杂交到绘制的目标区域而不是杂交到其它染色体区域，需要检测5个中期细胞。为了评估探针灵敏度和特异性，常染色体目标要检测100个中期细胞，性染色体目标则检测200个。探针灵敏度至少要95%，它的特异性至少98%。此评估可以执行到20个细胞（常染色体）或者40个细胞（性染色体）就结束，如果已检测过的中期细胞，灵敏度和特异性都是100%。如果探针的灵敏度和特异性小于95%和98%（各自），探针可能就不适合进行FISH检测或者杂交与洗涤条件可能需要进一步优化。
3）建立正常Cutoff值 建立决定正常cutoff值的数据库的第一步是构建一个可能被期望来与探针（探针集）一同观察的全部信号图像的完整清单。清单总应该包括探针目标获取或缺失的预期类型。对于用于检测导致目标相关位置改变的重排的探针组，清单应该包括最常见出现的重排的预期类型和常见的变异类型。三种统计学方法已经被用于计算FISH测试中的正常cutoff值。另外还有使用逆函数方法、最大似然方法和估计带有每个异常信号图像的细胞百分比的第95百分位数来计算cutoff值。没有一个方法能保证所有数据有效，因此建议在能获取更多数据的时候检测cutoff值的充足性。不考虑使用的方法，较高的cutoff值减少了假阳性结果但是增加了假阴性结果的可能性。相反，较低的cutoff值则增加了假阳性结果虽然降低了假阴性结构的可能性。
4）在被选择细胞或者服从环境程序的细胞群上执行FISH 在稀少细胞型中检查疾病相关FISH异常可以通过富集那种细胞类型的细胞群或者通过逐级过程识别特定类型的细胞然后描述那些细胞中的FISH信号图像被便利。在浆细胞瘤病人中执行FISH分析的实验室里正迅速使用这两种方法。
5）在石蜡包埋组织上执行FISH 对于石蜡包埋组织，FISH最常在4-6μm组织切片上执行。在切片上执行的FISH有保护标本结构的优势，这样就允许分析集中于感兴趣的区域，例如肿瘤组织。另一方面，切片引起了核断裂，这就导致了一些核中的信号缺失。为了避免人工信号丢失会因为目标所在地的丢失而被干扰的可能性，计数分析应该使用一个适当的控制探针。检测前变异是与石蜡包埋组织杂交探针的质量变化的重要源头。蛋白酶消化时间长度可能需要依据组织类型和固定时间改变。其它可变因素例如标本脱钙、固定时间、福尔马林质量和非福尔马林固定剂的使用也会影响杂交的成功，而且如果观察到了低劣的杂交可能需要进行改进。石蜡包埋组织便利了FISH在细胞遗传学实验室以外的环境中的使用。正如在细胞遗传学实验室中，非细胞遗传学实验室严格遵守IVD设备制造商对于试验确认，试验解释和质控的指南也至关重要。
6）与通过基因组微阵列检测结果查出的拷贝数量的FISH形象化相关的问题 基因组微阵列（CGH或者单核苷酸多态性）分析可以检查出矩阵中位置的获取和丢失，但是它不能识别根本的获取和丢失的细胞遗传学途径。FISH分析通常被使用在这种情况下并且也可以用于估计先证者家庭成员平衡重排的出现或者家庭拷贝数量改变。
然而，不适用与其他使用的实践问题出现在了FISH的应用中：
① 对于先证者，至少FISH主要地提供只补充微阵列分析数据的数据。
② 很多被微阵列检查出的拷贝数量改变包括基因组区域，仔细设计FISH探针购买不到。
③ 虽然它在技术上和经济上是实际的，一个满足其他FISH试验使用的技术标准的FISH分析的发展通常需要一个长期过程，此过程与用及时的途径完成病人工作的需要不一致。
④ 很多被阵列检测出的重复/缺失，特别是寡核苷酸阵列，都太小而不能被FISH检测出。
只要可能，用于此目的的探针应该定位于全部的重复/缺失区域而且应该是之前被实验室确认过的探针。先证者家庭成员的FISH分析应该被执行先证者分析的实验室执行。如果这不可能，执行家庭研究的实验室也应该确认它的探针。注意，除非之前确认过的FISH探针适合家庭研究，第二个实验室要能够获取先证者材料用于确认和阳性控制目的。
7）其它潜在标本来源 虽然FISH试验被广泛用于血液学和实体瘤标本，它也可以用于其它标本类型，这些类型标本的准备可能需要特殊处理。例如，如果玻片首先在室温融化然后固定于10%缓冲福尔马林中，冷冻组织切片的FISH可能产生好的结果。使用一个与传统细胞遗传学准备相似途径固定的“接触准备”可能也适用于FISH。注意，样品准备方法的变化可能会影响实验性能而且特定方法的确认可能是要求的。
2.5 试验的可重现性 试验可重现性是在特定条件下测量获得实验结果的一致程度。这个度量是一个在临床化学中用于定量评估各种被测量（分析物）的仪器和设备的重要特征。虽然毫无疑问试验可重现性在FISH检测中同样重要，在FISH中有意义的可重现性的测量是困难的。障碍包括缺乏适当的试验材料，可能被单次试验检查出的潜在的大量异常情况（每个单独被测量[分析物]）和生物混杂性包括异常本身和样品的细胞成分。
2.6 控制 在FISH检测中，一个内部控制可以是与相应染色体上相同所在地一样简单的东西。一个更有力的内部控制是一个被另一个探针（被一个不同的荧光标记）检测的第二基因组目标，它与试验探针同时杂交。在中期分子中，此类控制被用于确认杂交的有效性和识别有（或没有）试验位置的信号的染色体。在间期分析中，一个分开的控制位置被用作一个参考标准。如果试验包括第二个位置的检测，那个位置的探针应该与试验探针同时被最优化并且被确认。
外部控制品通常是与试验玻片类似杂交的参考玻片。只要试验要检测Y染色体上的位置，一个外部正常男性控制玻片通常是被要求的来确认杂交是成功的。一个试验阳性控制或者一个包含中期细胞的玻片可能被使用来保证正确的探针用于有少数（或者没有）中期细胞的玻片上。如果实验室没有使用外部控制玻片来保证使用了正确的探针（在每批试验中），它必须有一个替代方法来保证。
3. 分析过程
这部分讨论的方法应该被认为是常规指南。虽然他们适用于很多FISH分析，替代方法可能被FISH探针或者FISH试验成套装备制造商建议。对于商品的IVD成套设备，实验室应该遵守制造商的指导，即使指导与这些指南相悖。
3.1控制品的使用 只有带有预期数量控制信号的细胞应该被计分。对于中期细胞分析，探针信号应该被证实为杂交到了预期的正确位置。如果外部控制玻片与试验玻片平行检测，在试验报告开始之前他们应该被证明是如预期进行的。如果外部控制被用于试验QC目的，他们应该被也检测试验玻片的技术人员检测。如果制造商提供控制玻片（或者其他材料）来与FISH探针成套设备一起使用，这些控制应该按照建议被使用。
3.2中期分析 参与细胞计分的技术人员应该详细了解FISH探针设计和可能的信号类型：普通、典型的反常和可能的变体型。应该有计分的标准以便被一个FISH技术人员记录的类型可以轻易的与另一个FISH技术人员记录的类型关联。
① 至少两个有经验的个人应该参与中期细胞的分析；
② 病人、临床医生和探针信息在分析前应该被确认；
③ 证实不存在过度的背景荧光是重要的。如果可能影响信号识别的背景荧光存在，杂交应该被重复进行；
④ 染色体形态学应该被检查来确认正确探针的应用；
⑤ 在全部的情况中，除非全部的控制信号都出现了、中期细胞没有与其他细胞重叠、感兴趣染色体没有在目标位置重叠、并且不存在过度的背景荧光，一个中期细胞才应该被分析；
⑥ 对于非镶嵌体先天性疾病，两个阅读者间分开的10个或者更多的中期细胞，应该被分析。如果出现不一致的结果，应该分析额外的10个中期细胞；
⑦ 对于怀疑镶嵌体先天性疾病，两个阅读者间分开的50个中期细胞应该被分析来排除6%或者更多的马赛克，带有95%的置信区间（或者两个阅读者间分开的100个中期细胞应该被分析来排除3%或者更多镶嵌体，带有95%置信区间）；
⑧ 对于端粒FISH，对于每个混合探针，5个或者更多的细胞应该被分析，同时证实在10个中期细胞中的异常结果；
⑨ 对于标记染色体识别，对于每个探针或者混合探针，5个或更多的包含标记的中期细胞应该被分析；
⑩ 信号类型应该被记录，而且典型的图像（至少2个细胞）应该被生成且存档。
3.3 间期分析 参与细胞计分的技术人员应该详细了解FISH探针设计和可能的信号类型：普通、典型的反常和可能的变体型。应该有评分的标准以便被一个FISH技术人员记录的类型可以轻易的与另一个FISH技术人员记录的类型关联。
理想情况下，至少两个技术人员应该以盲法的方式给每个FISH探针计分。在每个实验室里第三个阅读者或者审核者的增加标准应该被建立。这些标准应该与临床环境相关，这样与正常cutoff值接近的计分之间的差异要比被分类为异常的计分之间的差异获得更多的关注。实验室应该监视需要第三个阅读者的情况以便有差异的结果可以被识别并且解决。
① 至少两个有经验的个人应该参与间期细胞的分析，实验室应该有程序可以最小化两个阅读者检测相同细胞的可能性；
② 病人、临床医生和探针信息在分析前应该被确认；
③ 证实不存在过度的背景荧光是重要的。如果有可能影响信号识别的背景荧光存在，杂交应该被重复进行；
④ 执行分析的技术人员应该知道检测是为了新的诊断还是疾病监控；
⑤ 间期细胞不应该被计分如果他们与其他细胞重叠或者如果出现了过度背景荧光；
⑥ 如果没有控制信号，间期细胞不应该被计分；
⑦ 如果异常细胞被发现成“簇”，此特征应该被标记；
⑧ 使用三带通或者双带通过滤器对于一些细胞中的信号计数来说可能是足够的。然而FISH阅读者应该使用单带通以便确认怀疑丢失的特定信号；
⑨ 病人标本分析间期细胞数量应该与探针确认期间间期细胞分析数量相同而且应该平分给两个阅读者；
⑩ 信号类型应该被记录，而且典型的图像（至少2个细胞）应该被生成且存档。
在间期研究中，不管什么时候碰到中期细胞，它应该被检测。中期细胞的分析可以作为使用正确探针的QC检查，并且异常中期细胞的分析可以提供关于基因组文献负责的异常信号类型的额外信息。
3.4染色体计分/目标计数
① 信号在没有破裂的没有重叠的细胞内；
② 信号是恰当的分离的（一个关于什么组成了分离信号的定义应该被包含在实验室试验确认和检测程序中）；
③ 相同染色体或者不同染色体上的控制信号存在的时候给观察到的信号数量计分。注：如果4个或者更多信号出现在一个细胞簇里；考虑基因扩增的可能（对多体和/或多倍体）。
3.5 融合和分裂探针集计分 将一个信号作为融合计分：
（1）如果信号是清楚的重叠（重叠区域红色/绿色融合可能出现一个黄色信号）；
（2）如果没有重叠，两中颜色的探针之间的距离少于或等于一个典型信号的直径；
（3）当两个信号之间的距离小于一个特定预设值（一个关于什么组成了分离信号的定义应该被包含在实验室试验确认和检测程序中）注意：
① 变异信号型可能出现在DF探针策略中，这样一个带有变异单一颜色信号的单一融合会出现。这些应该被认为是一个异常信号类型；
② 使用ES FISH策略，外部信号可能丢失，重叠或者非常暗。外部的荧光碎片可能类似与外部信号的出现；
③ 基因扩增也可能在融合或“断裂”（分裂）探针中出现（例如，ABL1，MYC和MLL）。
3.6石蜡包埋组织切片 肿瘤标本的分析需要一个解剖或者外科病理学家参与。对于遗传学混杂可能出现的标本，杂交的整个区域应该被浏览。如果一个异常信号型在从前感兴趣的标记区域之外的区域被识别，这些区域应该与组织学有关联。只有未重叠，未破裂的细胞核要被计分。适当的计分应该需要聚焦于从头到尾来保证全部的信号都被识别了。变异信号型，包括能够提示基因扩增的多信号簇的信号类型应该被记录。特征性地石蜡包埋FISH不适用于使用计数探针评估小残留疾病或者低水平镶嵌体。在评估石蜡包埋标本的缺失时应该谨慎，而且只有在证实有控制探针杂交的细胞核时才能够被计分。
3.7石蜡包埋组织，提取细胞核 细胞核提取技术只适用于评估实体或者同质肿瘤标本。核提取不应该用在组织结构是分析所必须的标本上。从石蜡包埋组织中提取的细胞核应该使用与其他完整细胞源中准备的核同样的方法进行检测。
3.8使用FISH进行染色体组微阵列结果的确认和跟踪家族研究对于缺失的可视化，建议中期细胞分析。中期细胞分析也适用于非串联重复和大量串联重复。间期细胞分析可能需要来说明重复是一个串联重复的可能性。如果此异常是一个重复而且在中期分析中外部信号没有作为证据，分析应该扩展到检测至少50个间期细胞。如果基于染色体微列阵结果怀疑镶嵌体，额外的细胞就需要通过FISH进行分析。
4. 报 告
4.1报告内容
①编写的报告应该包括全部的实验室认可部门要求的人口统计学的和样品的数据；
②用于执行试验的探针的来源和鉴定正如它的遗传学术语中（基因标志或者定位标志）指出的应该被包含在报告中；
③认可的人类基因组组织基因命名委员会基因标记应该被用在报告中；
④ 如果FISH分析被限制于选择的细胞中，选择标志应该被列在报告中；
⑤ 如果技术质量不充足，报告应该包括对另一个样品的申请；
⑥ 报告应该包括报告日期并且指出是否此结果与任何预备的结果一致；
⑦ 报告应该被适当认可的实验室负责人签名。
如果一个电子签名被使用，它必须遵守适当规则。除了上述内容，报告的结果应该包括观察的信号型，分析的细胞数量，有每个临床相关信号型的细胞数量。细胞遗传学系统命名法，可以被用于描述结果，但是报告也应该包括一个正文的解释（例如，正常、异常、缺失、重排）和任何试验结果的意义，后者应该被突出的展示在报告中。当描述试验结果的意义时，考虑病人临床状态、标本来源、样品检测前被暴露的环境和试验的全部局限性是重要的。
4.2考虑报告免责声明
① 报告可能陈述阳性、阴性和/或意义不明/灰区实验结果；
② 警告声明这些结果应该与其它临床结果关联而且不应该被考虑为一个单独的结果，这可以为正常cutoff值附近的检测结果作保证；
③ 如果，在一个诊断性样品分析中，异常细胞被发现成“簇”此描述可能被保证提及，因为它可能影响监测研究的可靠性；
④ 如果没有诊断性样品被提供用于FISH基线分析，而且一个正常结果被获取了，一个报告应该陈述一个局限性：正常研究假设寻找的异常会被要求的FISH探针识别；
⑤ 如果检测是执行在一个不是试验被确认组织的组织类型上，一个此影响的陈述要保证在报告中；
⑥ 考虑政府或者监管部门要求的特定免责声明，视情况而定；
⑦ 报告应该建议不可逆的治疗措施不能只依据异常的胎儿FISH结果；
⑧ 正常FISH没有排除试验没有设计检测的异常，因此附加的遗传学研究可能被允许来排除其它诊断性异常；
⑨ 另外，常规染色体分析或者分子学检测可能被需要来建立导致异常FISH结果的事件/机制。
4.3记录 产生在样品处理和检测过程中的记录提供了结果的客观证据。实验室应该保留特定结果的图像、试验报告、和全部检测记录。关于保留什么和要保留多长时间根据实验室地点和试验标本来源不同而不同。用于FISH分析的幻灯片通常在实验室负责人的指导下储存。幻灯片储存到全部试验完成是通常的要求，但是一些监管部门可能要求更长时间的储存。
5. 质量管理
5.1人员 参与FISH分析的实验室人员应该非常精通此方法的根本原理并且应该有一个对常规实验室和质量管理程序的综合理解。人员资格和训练的最低标准已经被专业组织和监管部门发布。全部的检测人员应该在他们可能参与的FISH试验的适用特定程序的工作过程中完全被训练。全体实验室人员的资格和责任应该被记录在职位描述中。注意阅读相同FISH试验的人员的分析差异可能是由于阅读技术的不同引起的。实验室应该有办法监视这种不同并且应该尝试通过训练和持续能力评估来限制这些不同。
5.2文件和记录 实验室应该有政策来定义它的质量控制（QC），质量保证（QA）和质量改进过程，同时有政策和程序描述执行FISH试验的类型和要被检测的标本类型。实验室也应该建立用于评估FISH试验的检测前、检测中、和检测后过程的度量。实验室被要求使用以下要素控制他们的文件和记录：
① 文件鉴定、主文件、索引；
② 新记录的产生、审查、和批准；
③ 对已认可文件改变的审查与批准；
④ 未改变文件的定期审查；
⑤ 文件评估与发布；
⑥ 文件的获取、储存、保留或者处理。
5.3质量控制 如果实验室从制造商处购买一个新的FISH探针批号，实验室应该评估探针质量。评估应该包括使用实验室从前建立的方法进行探针定位的证实和探针杂交效率的评估。后者可能通过检测探针灵敏度和特异性来完成。对于实验室执行的每个FISH试验，它都应该监视，如果需要，每年两次重新校准试验。对于那些解释是基于参考数据库的试验，实验室也应该有方法来保证技术“漂移”没有损害到来源于那些数据库的cutoff值的可靠性。完成这项任务的方法包括用新的控制样品数据来增加（或替换）数据库样品数据和从已知标本处获得结果的系统性比较来建立cutoff值。
实验室应该记录和调查差错或不遵从实验室建立的政策、过程、程序、或者其他强加要求的事件。监视计划采集和分析信息从而识别问题和它们的原因以便采取纠正措施。此过程包括识别、分类、调查、记录、补救措施（如果指出）和一个预防未来相同性质问题的行动计划。
5.4质量保证
① FISH探针和使用探针的试验成套设备的监管状况和制造。实验室应该认识到政府监管可能影响FISH探针怎样（或可否）在临床检测中使用。FDA和CE 标志系统可能是最知名的保证此类产品质量的政府系统。
② 认可。实验室应该被全部适当的政府和监管部门许可或者认可。
③ 能力验证和实验室审计。
实验室性能的客观证据被内部和外部测量评估。实验室应该参与外部许可或认可、能力验证和性能比较。外部组织使用发布的要求和指南来评估实验室。如果问题被识别，实验室就要求来采取纠正措施以持续许可或认可。实验室应该参与两类内部评估：
1）质量指标检测和2）实验室审计。质量指标是被追踪的过程性能的检测（例如，标本充足、周转时间和过程失败）。实验室应该识别一个或者更多指标来检测检测前、检测中和检测后工作过程的性能。实验室审计将较真实情况与要求进行比较。将结果展示给实验室主管/负责人/管理层。任何检测前、检测中、检测后或者管理过程都可以进行审计来确定它与建立的政策、过程、和程序以及外部监管和认可要求的一致性。
参考文献
CLSI.MM07-A2—Fluorescence In Situ Hybridization Methods for Clinical Laboratories;Approved Guideline — Second Editon.
摘自定向点金《临床实验室》杂志2013年第十一期
编辑：范伟伟
