核酸室内质控品的制作及应用
在临床分子生物学检测中，室内质控品是控制检测质量的重要手段。质控品和校准品不同，校准品可以使用假病毒、合成序列或质粒，但理想的质控品应使用临床样本，而且要尽可能少添加或不添加防腐剂等PCR干扰物质，以便有效监控核酸制备或扩增的质量。一个规范的实验室，每次实验不但到带齐试剂盒的校准品和质控品，而且还应设立自己的室内质控品，只有这样才能准确追溯检测中的质量问题。本文对室内质控品的制作和应用进行论述，供大家参考。
室内质控品的选择原则应与检测样本一致，如检测样本是血清或血浆，质控品也相应为血清和血浆；如果是全血或组织、细胞，质控品也应如此。这一要求在试剂厂家的成品试剂盒中实现起来比较困难，但在临床实验室较为容易。简单的做法是，将临床检测后的样本（包含各种干扰物质的样本）按阴、阳性分别混合收集，采用临床试剂盒对混合样本进行检测，如果适合做室内质控品，则采用国家参考品（标准品），对该阳性样本进行溯源定值，根据检测结果，采用阴性混合样本将阳性样本稀释至定量限的10倍浓度，该浓度为法规要求的试剂盒低值精密度靶值，作为低值室内质控品。
质控品介质如有明确的稳定性资料支持，可不进行稳定性研究，在以后的临床使用中观察其稳定性，如果缺乏稳定性支持资料，实验室应制定稳定性研究方案，根据室内质控品的预估效期每月或每三个月进行实验，直至出现连续两次以上的失控，确认所制备的质控品的确处于不合格状态，失控前的时间即作为有效期的最后一天。
每次临床检测至少带一个室内质控品，对其ct值和定量值进行记录，制作质控图，以2SD为失控线进行评价，在使用过程中要及时发现检测值的漂移，如出现失控情况，应进行复测并分析失控原因，规范实验操作。质控品一旦失效应立即停用。
5. 试剂盒自带质控品的应用
目前国内有几家专业提供质控品的公司，如HBV DNA和HCV RNA定量质控品，我们对两家公司的质控品和中检院质控品进行对比研究，发现三家HBV DNA质控品定值较为一致，而且兼容多种核酸制备方法。但HCV RNA只有中检院的质控品兼容多种核酸制备方法，而另外两家质控品则呈现出对不同核酸制备介质的选择性，说明质控品并非是来自野毒株的临床样本，因此该类质控品作为试剂盒性能评价和临床质量评价十分牵强。
（作者：王海滨 来源：iqPCR）
