梅毒实验的困惑，真阳性 or 假阳性？
作者：六盘水市人民医院 浮星 燕子
案例回顾
患者李某，男性，45岁，因下体不适一月，生殖器红肿不适，就诊于皮肤科门诊。半年前因淋病使用卓青治疗，后病情好转。患者自述离异，并有冶游史，其余不详。实验室检查中乙肝标志物（ELISA）阴性，HIV抗体（ELISA）阴性，甲肝抗体（ELISA）阴性，丙肝抗体（ELISA）阴性，戊肝抗体（ELISA）阴性。而运用不同方法检测梅毒抗体时，出现了不寻常的结果。其余未查。
下图是梅毒抗体检测过程：
下图是检测结果：
下图是三个厂家的金标试纸条：
下图是TPPA结果：
那么，该患者TPPA究竟是真阳性还是假阳性呢？
知识回顾：
人体感染梅毒后会产生2种抗体，一类是对类脂的抗体，该抗体与从牛心中提取的心磷脂在体外可发生抗原抗体反应，该抗体无特异性；另一类为抗梅毒螺旋体的特异性抗体，此抗体由病原体产生。感染后大约2周即可检出抗体。RPR试验检测的是前者，TPPA、ELISA检测的是后者。
梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）是使用纯化的梅毒螺旋体（N ichols株）抗原致敏明胶粒子，致敏粒子与待检血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集。
1、其敏感性和特异性高于RPR或者TRUST，但是操作复杂，试剂昂贵，结果判读依靠目测，难以自动化受到主观因素的影响，无法用于大规模标本的筛查有定性和定量（抗体滴度）两种结果报告方式。
2、不能用做疗效观察指标；可用做梅毒初筛，确认实验，特异性好于TP-ELISA。
3.提示既往感染或者现症感染。
ELISA法测定梅毒螺旋体抗体是双抗原夹心法的原理，将高纯度梅毒螺旋体（TP）特异抗原包被于微量反应孔中，加入标本和已标记TP抗原，形成抗原-抗体-酶标记的TP抗原夹心复合物，再加显色液（过氧化脲/TMB)，产生颜色反应，显色强度与TP抗体水平成正比。
1、敏感性和特异性均高于RPR或者TRUST，但是不能用做疗效观察指标。
2、对于孕妇和老年人群，自身免疫性疾病等的假阳性较高。
3、既往感染或者现症感染。
4、IgM抗体不能通过胎盘传播到婴儿。IgG类抗体可以通过胎盘传播到婴儿。
RPR试验是以心磷脂加入活性炭组成的复合物为抗原，结果判断有定性和定量两种方式。阴性：呈黑色均匀分散。阳性：出现黑色凝集块，根据凝集块大小记录1+～4+。
分析讨论
1、标本经过了ELISA复检，可以排除人为和仪器误差导致的假阴性。
2、TP-ELISA是利用基因工程技术，重组表达15kD、17kD、45kD、47kD三种蛋白，制备的梅毒抗体检测试剂盒。此例患者可能有一些非主要梅毒抗原产生的抗体，并不针对这四种蛋白。
3、该患者可能存在针对这四种蛋白的抗体，但量极少，以至于不能参与ELISA的反应。
4、患者可能采取服用免疫球蛋白血液制剂等治疗方法使TPPA阳性。
5、患者可能患有基础疾病使机体释放诱导产生抗类脂抗体与抗TP的交叉抗原或体内有口腔、皮肤、肠道螺旋体共生，诱导产生特异抗原的交叉反应抗体。
处置
1、TPPA试验中，对未致敏粒子和致敏粒子均显示（±）以上凝集的样品，需要用未致敏粒子对血清吸收后再试验。
2、积极与临床、患者沟通，寻找其它诊断依据。
3、动态检测患者梅毒抗体，有条件的可考虑做梅毒螺旋体核酸检测、荧光梅毒螺旋体吸附试验等进一步试验。
总结
梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要手段之一，但不是唯一手段。梅毒的诊断，除依据检验结果外，更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史，以及其他详细的体查。
遇到特殊情况需与临床医师沟通，有助于他们综合分析后慎重做出判断。以便更好的为病人服务。
【参考文献】
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来源：检验医学网
