血栓与止血检测的标本采集
血栓与止血检验的标本采集以及前处理直接影响实验结果的准确性,因此要求所有步骤均应严格按照操作常规进行。
一、标本的采集
㈠采血前的准备工作
采血时,首先应确认患者姓名。安慰患者,努力减轻患者的恐惧心理。尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行,即患者处理休息状态,并且在早餐前采血。
服用某些药物或某些生理状态(如怀孕、情绪激动或剧烈运动)会对一些凝血试验结果造成影响。阿司匹林、双嘧达莫和力抗栓等药物等抑制血小板聚集;口服避孕药会使血小板粘附功能、血小板聚集功能和纤维蛋白原、凝血酶原及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ的活性明显增高;剧烈运动或输注肾上腺素时,Ⅷ因子活性快速上升。故一般在进行此类检查时,应停用有关药物1周,因故不能停药者,必须注明。
㈡采血的技术要点
患者要求:取血时患者应松驰,环境温暖,防止静脉挛缩,止血带的压力应尽可能小,压力大及束缚时间长可造成局部血液的浓缩和内皮细胞释放t-PA,后者将引起纤溶活性增加。
部位:除了出血时间及对新生儿的某些检测外,绝大多数凝血检测均应使用静脉血。
采血人员:应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤和外源性凝血因子进入针管。
标本放置时间:尽量缩短。这对某些检测很重要,如Ⅷ因子最不稳定,纤维蛋白肽A和β-TG在稍有组织损伤或标本放置时间较长时即可导致结果改变。
试管:凝血检测标本最好单独采集,否则会因标本的分配、分装等而使血液停留在针管的时间延长。止凝血样本采集时一般提倡用带塞试管,血与抗凝剂在试管中需颠倒混匀10次,但要避免用力振摇。NCCLS提倡应用高质量塑料或聚乙烯试管收集标本,此管应有充分的透明度,根据血量设计,且应有充分空间便于血液与抗凝剂混合。取血后管内剩余空间应不小于所抽血液体积的15%。 使用的商品收集管应保存在2℃~8℃,要定期抽样检查其内的液体抗凝剂量,防止由于蒸发和遗漏,而致抗凝剂减少。从输液三通管取血的做法不可取。因为采取的样品常含小凝血块及污染的组织液,有时尚可混有此途径给予的药物,如肝素反流在样品中,导致凝血时间不应有的延长,也有报道此时可加速血小板激活及PF4分泌增加。
其他:取血时,拉针栓的速度要慢且均匀,使血液平稳地进入注射器,防止气泡的产生。如果抽血过慢或不太顺利,可能激活凝血系统,试验结果将会显示凝血因子活性增高,血小板数假性降低等异常结果。一旦取样完毕,立即与抗凝剂在度管内充分混合。
二、标本的保存
标本保存的温度与时间可影响凝血因子的促凝活性,因此严格的标本保存措施是分析前质控的重要内容。从表1-1所显示的数据,可以清楚地看出不同条件下保存的血浆对凝血因子活性的影响。
表1-1 温度和时间对凝血因子活性检测结果的影响(%)
根据止凝血因子的变化规律,建议实验标本采用表1-2的保存条件。所采血样原则上应立即检测,若无法满足试管口应加塞否则将会因CO2的散失而导致pH值的改变。如果不能在4小时内完成所有试验,应将血浆标本低温保存(-70℃~-20℃),试验前将血浆于37℃下快速融化。血小板聚集试验应在采血后2小时内完成。
表1-2 关于凝血、抗凝及纤溶系统保存条件的
一、标本的采集
㈠采血前的准备工作
采血时,首先应确认患者姓名。安慰患者,努力减轻患者的恐惧心理。尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行,即患者处理休息状态,并且在早餐前采血。
服用某些药物或某些生理状态(如怀孕、情绪激动或剧烈运动)会对一些凝血试验结果造成影响。阿司匹林、双嘧达莫和力抗栓等药物等抑制血小板聚集;口服避孕药会使血小板粘附功能、血小板聚集功能和纤维蛋白原、凝血酶原及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ的活性明显增高;剧烈运动或输注肾上腺素时,Ⅷ因子活性快速上升。故一般在进行此类检查时,应停用有关药物1周,因故不能停药者,必须注明。
㈡采血的技术要点
患者要求:取血时患者应松驰,环境温暖,防止静脉挛缩,止血带的压力应尽可能小,压力大及束缚时间长可造成局部血液的浓缩和内皮细胞释放t-PA,后者将引起纤溶活性增加。
部位:除了出血时间及对新生儿的某些检测外,绝大多数凝血检测均应使用静脉血。
采血人员:应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤和外源性凝血因子进入针管。
标本放置时间:尽量缩短。这对某些检测很重要,如Ⅷ因子最不稳定,纤维蛋白肽A和β-TG在稍有组织损伤或标本放置时间较长时即可导致结果改变。
试管:凝血检测标本最好单独采集,否则会因标本的分配、分装等而使血液停留在针管的时间延长。止凝血样本采集时一般提倡用带塞试管,血与抗凝剂在试管中需颠倒混匀10次,但要避免用力振摇。NCCLS提倡应用高质量塑料或聚乙烯试管收集标本,此管应有充分的透明度,根据血量设计,且应有充分空间便于血液与抗凝剂混合。取血后管内剩余空间应不小于所抽血液体积的15%。 使用的商品收集管应保存在2℃~8℃,要定期抽样检查其内的液体抗凝剂量,防止由于蒸发和遗漏,而致抗凝剂减少。从输液三通管取血的做法不可取。因为采取的样品常含小凝血块及污染的组织液,有时尚可混有此途径给予的药物,如肝素反流在样品中,导致凝血时间不应有的延长,也有报道此时可加速血小板激活及PF4分泌增加。
其他:取血时,拉针栓的速度要慢且均匀,使血液平稳地进入注射器,防止气泡的产生。如果抽血过慢或不太顺利,可能激活凝血系统,试验结果将会显示凝血因子活性增高,血小板数假性降低等异常结果。一旦取样完毕,立即与抗凝剂在度管内充分混合。
二、标本的保存
标本保存的温度与时间可影响凝血因子的促凝活性,因此严格的标本保存措施是分析前质控的重要内容。从表1-1所显示的数据,可以清楚地看出不同条件下保存的血浆对凝血因子活性的影响。
表1-1 温度和时间对凝血因子活性检测结果的影响(%)
32℃ | 20℃ | 4℃ | ||||||||||||
0 h | 6 h | 12 h | 24 h | 0 h | 6 h | 12 h | 24 h | 0 h | 6 h | 12 h | 24 h | |||
因子Ⅷ | 134 | 65 | 55 | 7 | 134 | 122 | 56 | 41 | 134 | 127 | 61 | 39 | ||
因子Ⅸ | 125 | 82 | 73 | 37 | 125 | 121 | 104 | 93 | 125 | 121 | 112 | 106 | ||
因子Ⅺ | 102 | 87 | 82 | 63 | 102 | 101 | 99 | 91 | 102 | 103 | 100 | 98 | ||
因子Ⅻ | 85 | 84 | 85 | 82 | 85 | 87 | 83 | 86 | 85 | 86 | 85 | 87 |
根据止凝血因子的变化规律,建议实验标本采用表1-2的保存条件。所采血样原则上应立即检测,若无法满足试管口应加塞否则将会因CO2的散失而导致pH值的改变。如果不能在4小时内完成所有试验,应将血浆标本低温保存(-70℃~-20℃),试验前将血浆于37℃下快速融化。血小板聚集试验应在采血后2小时内完成。
表1-2 关于凝血、抗凝及纤溶系统保存条件的
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