革兰氏染色标准操作规程
原理本染色是最基本的染色法，染色结果将细菌分为革兰阳性（紫色）和革兰阴性（红色）两类，可用于标本涂片或菌落涂片。
一、标本采集与处理
选择正确生理部位和采集合适的标本及其正确运送等环节至关重要。而所有与标本质量有关的检验工作者必须要了解在整个实验过程中保证标本质量的重要性和必要性。
标本的选择与采集：采集送检标本前，标本选择的种类和采集部位必须反映有效病程。一个没有有效病原体的标本是没有临床诊断价值的。要避免常居菌群随时可能造成的污染，以确保取得反映感染过程的典型标本。
标本的送检:所有标本都必须立即送往实验室，最好在2小时内。如不能及时送检，细菌病原体待检标本应按规定条件下存放，通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过２４小时。临床标本或传染性材料从一个实验室到另一个实验室的送检，不论距离长短，都要求严格注意标本的包装和标签说明。所要运送的材料必须贴上适当的标签，包装得当。送检期间要予以安全防护。
二、试剂制备
1、结晶紫溶液:
A液：结晶紫2.0g
95%乙醇20ml
B液：草酸铵0.8g
蒸馏水80ml
用前24h将A、B液混合，过滤后装入试剂瓶备用。
2、碘液
碘1.0g
碘化钾2.0g
蒸馏水300ml
将碘与碘化钾混合研磨，加少许水至完全溶解。最后补足水量。
3、脱色液（丙酮酒精）
95％酒精97ml
丙酮3ml
稀释复红
石碳酸复红10ml
蒸馏水90ml
三、染色方法
涂片经火焰固定，加结晶紫液染1分钟，清水冲洗。加碘液染1分钟，清水冲洗。加丙酮酒精脱色，不时摇动约15-25秒，至无紫色脱落为止，清水冲洗。加稀释复红染15-25秒，清水冲洗。干后镜检。
四、注意事项
染液注意密封，以免凝结产生沉淀影响使用效果。体液标本均应离心后取下层沉淀液与染液混合，以提高检出率。提高责任心，做到全片检查。
五、临床意义
将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两大类，有助于进一步鉴定。还可为临床选择用药提供参考，帮助临床制订有针对性的治疗方案。
