消除法测定高密度脂蛋白胆固醇试剂盒的评价
【摘要】目的 根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案，评价消除法高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，并观察其临床应用可能性。方法 采用消除法测定血清中高密度脂蛋白胆固醇水平，并对其精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析。结果 批内精密度，n = 20，x = 1.359 mmol/L，CV = 1.1 %，和n = 20，x = 2.041 mmol/L，CV = 0.96 %；天间精密度，n = 20，x = 1.368 mmol/L，CV = 1.91%，和n = 20，x = 2.285 mmol/L，CV = 1.79%；线性范围至少可达4.0 mmol/L；相关性 本试剂盒(Y)与日本B公司(X)生产的试剂盒比较，Y =1.7517X – 1.75, γ = 0.980, 显示两法相关性良好。抗干扰结果显示：血红蛋白< 5.0g/L、抗坏血酸<500mg/L、浊度<5000单位、胆红素30mg/dL时，对本法无干扰。结论 日本电化生研的利用消除法原理的HDL-C试剂盒具有良好的分析特性，可在临床推广使用。
【关键词】高密度脂蛋白胆固醇；消除法；评价。
Evaluation of the clearance method for measuring serum HDL-cholesterol ket
【Abstract】 ObjectiveEvaluation of the clearance method for measuring serum HDL-cholesterol ket according to evaluation protocols ofNCCLS. Methods the clearance method for measuring serum HDL-cholesterol ket method was used to assay measuringHDL-cholesterol in serum and its precision, linearity range, interference factor and correlation were analyzed. Resultsprecision: within-run n = 20，x = 1.359 mmol/L，CV = 1.1%，andn = 20，x = 2.041 mmol/L，CV = 0.96%；between-day-to-dayn = 20，x = 1.368 mmol/L，CV =1.91%，and n = 20，x = 2.285 mmol/L，CV = 1.79%；Linearity: 4.0 mmol/L。Compared with the same reagent of B Company,Y（生研）= 1.7517X – 1.75,γ = 0.980。Conclusions the clearance method assay for serum HDL-cholesterol shows good analytical and is valuable for clinical application.
【Key words】 HDL-cholesterol；clearance method；Evaluation.
许多临床和流行病学资料表明，血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的浓度与冠心病（CHD）发病危险呈独立的负相关。40%以上心肌梗死患者的主要危险因素为HDL-C低下。Framingham心脏研究等四个规模较大的研究结果都一致表明，不论是在男性或是女性人群中，血清HDL-C水平每升高0.026mmol/L(1mg/dL),患冠心病的危险性即降低2%~3%。即使是校正了其他的冠心病危险因素后，也是如此[1]。因此，HDL-C的测定已被各临床实验室广泛使用，特别是直接法（均相法）的闻世，使该项目应用更为普遍。就直接法应用的测定原理，大致可归纳为：化学酶修饰法、选择性抑制法、抗体阻碍法及消除法等四类。我们根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）文件对日本电化生研（DENKA SEIKEN）提供的利用消除法原理的HDL-C测定试剂盒作了一些方法学评价，报告于下。
材料和方法
一、材料
1．仪器： 日立7170全自动生化分析仪。主要参数：温度 37℃，波长（主/副） 600/700nm，
样品量 2.4ml，试剂1（R1） 180ml，试剂2 （R2）60ml ，测量点 18、27，测定方法：2点终点法。
2．试剂： 日本电化生研株式会社提供的HDL-C（HDL-EX）测定试剂盒。批号：R1：561534；R2：561507。其主要成份：R1为胆固醇酯酶(CHE) 、胆固醇氧化酶(CHO)、N-(2-羟-3-磺酸丙)-3，5-二甲氧基苯胺(HDAOS) 、过氧化氢酶；R2为过氧化物酶、4-氨酰安替比林(4-AA)。
反应原理：第一反应：样品中存在的除HDL以外的脂蛋白中的胆固醇在CHE、CHO及过氧化氢酶的作用下，被分解。第二反应：样品中的高密度脂蛋白-胆固醇在CHE、CHO的作用下，生成胆甾烯酮及H2O2。生成的H2O2在过氧化物酶的参与下。使4-AA与HDAOS产生缩合反应，生成醌类色素。生成的色素量的吸光度变化与样品中HDL-C含量成正比。
3．校准品： 由日本电化生研提供的由HECTEF（CTH）所赋值的脂质校准品-D，产品编号：562128。
4．评估分析：采用NCCLS的方案进行操作。
二、统计学方法： 检测数据以x ± s 表示，线性关系采用线性相关性分析。
结果
一、精密度测定
按NCCLS EP5-T2评价进行操作。
1．用两份血清，重复测定20次，以求得批内CV。另用两份血清，各分装成40小份，-70℃保存，每天上下午各取一份测定，以求得天间CV，结果见表1。
表1精密度测定
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