尿液沉渣流式细胞学检测鉴别血尿来源的初步研究

　　【摘要】  目的：研究用尿液沉渣流式细胞仪检测来鉴别血尿来源，以期建立快速准确的血尿来源鉴别方法。方法：用Sysmex UF-100流式尿沉渣自动分析仪检测29例经肾活检证实为肾小球疾患病例的尿液标本及临床确诊为非肾小球性疾病患者的尿液标本90例，另有30例混合性血尿标本，结合临床进行分析。结果：各型血尿红细胞前向散射光强度（FSC）及直方图改变各具特征。结论：尿流式细胞仪检测诊断血尿来源的敏感性及特异性较高，有广泛临床应用价值。

　　【关键词】  流式细胞学；鉴别；血尿

　　尿液中红细胞来源的判断是血尿鉴别诊断的关键环节之一。我国医学界传统上长期并仍在应用相差显微镜及肾穿刺来鉴别血尿来源［1］，我们用流式尿沉渣自动分析仪，检测了29例肾活检确诊的肾小球疾病患者的尿标本及90例非肾小球性疾病患者的尿液标本和30例混合血尿标本，并与相差显微镜红细胞形态检测的结果进行了比较，现将结果报道如下。

　　1  材料与方法

　　1.1  研究对象

　　经肾活检确诊的肾小球疾病患者29例，男14例，女15例，平均年龄(28.5±6.2)岁。包括IgA肾病14例、系膜增殖性肾炎6例、膜增殖性肾炎3例、狼疮性肾炎5例、骨髓瘤肾病1例。并对90例经临床诊断为非肾小球性疾病患者及30例混合性血尿进行检测，所有患者均留取晨尿，同时进行流式尿沉渣自动分析仪及相差显微镜检查。

　　1.2  流式尿沉渣自动分析仪检查

　　取新鲜晨尿10 ml，置试管内混匀，仪器自动吸取800 μl，通过细胞粒度及荧光强度分辨有形成分，并根据DNA结合荧光强度分辨病理管型和透明管型。仪器分析诊断标准为：若≥80%的尿红细胞<126 ch并且<80%的红细胞大于84 ch，提示可能是肾小球性红细胞，显示为“Dysnmorphic？”，即非均一性红细胞血尿；若≥80%的尿红细胞>84 ch，系统提示可能是非肾小球性红细胞，显示为“Isomorphic?”诊断为均一性红细胞血尿；若<80%的红细胞<126 ch，且<80%的红细胞>84 ch，显示为“Mixed?”，即为混合性血尿。流式尿沉渣自动分析仪为sysmex公司UF-100型流式尿沉渣自动分析仪。

　　1.3  相差显微镜检查

　　取新鲜晨尿10 ml，500 r/min离心5 min，呼少许沉渣充满自细胞计数板，在镜下观察红细胞形态。诊断标准为：均—性：细胞大小、形态一致，血红蛋白分布均匀；非均—性：大小不等，形态多样，有突起，胞内血红蛋白颁异常；混合性：样品中上述两类形态红细胞均未达到80%。

　　2  结果

　　2.1  两种检测方法判断尿液中红细胞形态

　　如表1所示，29例肾小球疾病患者中，27例经流工尿沉渣自动分析仪检测诊断非均—小红细胞尿，1例轻度系膜增殖性肾炎患者诊断为非畸形红细胞尿（混合性1例、均—性1例）。若单纯采用FSC这一指标诊断肾小球性血尿，其诊断符合率为93%。表1  两种检测方法判断尿液中肾小球性血尿红细胞形态结果比较（略）

　　另外，尿沉渣自动分析仪可检测病理管型，非畸形红细胞尿与其综合分析可提示肾小球性血尿。在本组2例非畸形红细胞尿中，有1例发展病理管型，故流式尿沉渣自动分析仪总的诊断符合率为96%。

　　29例患者的同一标本经相差显微镜检测诊断为畸形性红细胞尿有23例，混合性3例，均一性3例。其中1例混合性血尿患者检出颗粒管型提示肾小球性血尿，故相差显微镜总的诊断符合率为83%。

　　2.2  两种检测方法差异性检验

　　经χ2检验两种检测方法之间差异无显着性。

　　3  讨论

　　尿红细胞形态相差显微镜检测过多地依赖于检测者的经验、耗时长，诊断标准尚不统一［2］；流式尿沉渣自动分析仪采用流式细胞仪的原理，是应用流式细胞术（flower cytometry）原理，将尿中有形成分经荧光染色，通过导电管，经氩激光（argon laser）照射，经荧光波形信号分类，计数，显示，可定量测定每微升尿中有形成分并打印报告。还能对尿中红细胞形态的大小进行分析，由肾小球而来的红细胞经荧光染色激光照射时前向散射光强度（FSC）分布在中心点（鉴别点）左侧一方，非肾小球血尿的红细胞前方散射光强度分布在中心点右侧一方，因此由尿中红细胞的大小鉴别肾内、肾外血尿是可能的，可由UF-100尿沉渣全自动分析仪的红细胞影像直方图显示  。区分尿沉渣中的各种有形成分，尤其能够方便地将红细胞与各种有核细胞区分开［3］。同时，检测到白细胞、细菌、结晶、管型等有形成分的信息对于血尿来源的鉴别诊断也很有帮助。该仪器不仅能够探测到管型，而且能够区分透明管型与病理管型，这也增加了它作为一种血尿来源鉴别方法的优越性。但是，本研究发现个别肾小球疾病患者用流式尿沉渣自动分析仪诊断为均一性或混合性血尿，而镜检诊断为畸形［4，5］，这与