关于新型冠状病毒检测试剂盒研发的建议

新型冠状病毒肺炎流行以来，我国生物医学工作者充分展示了崇高的爱国热情和较高的科学技术水平，在不到一个月的时间里就分离了新型冠状病毒，做了病毒基因的序列分析，研制出了许多nCoV检测试剂盒。首批试剂盒经NMPA的快速审批后立即运抵疫区，在新型冠状病毒肺炎的诊断中发挥了重要作用。目前，nCoV检测试剂盒的研发热情方兴未艾，据说等待NMPA审批的还有许许多多。

必须肯定，首批试剂盒的问世对新冠肺炎的诊断立下了汗马功劳。根据抗击新冠第一线的检验界勇士们的反映，这些试剂盒总体质量还是好的，但是仍然还有一些需要改进和提高的地方。当然，任何产品都需要不断改进和提高，这并不会影响对于这些试剂盒的总体评价，特别是在那么短的时间里，那么急切的需求下，研发和生产者放弃春节的家庭团聚，挑灯奋战，精神实在可嘉！

因为研发时间短，“披挂上马”比较仓促，目前使用的试剂盒可能总会有某些不足，希望已经上市的产品研发者收集临床一线的实际使用信息，对产品的性能参数作进一步的评价，发现问题及时解决，及时改进，以便让我们的产品在抗击新冠的斗争中更趋完善。对于目前仍在研发过程中的产品，我们作了部分调研，现提出一些建议供大家参考：   

1. 关于基因检测的靶点。卫健委发布了《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》，明确要求“核酸检测方法主要针对新型冠状病毒基因组中开放读码框1ab（open reading frame 1ab，ORF1ab ）和核壳蛋白（nucleocapsid protein，N）。当然，如果能够针对更多的特异性靶点那更好，但是，现在有的研发者只针对上述一个靶点，显然是不合适的。

2. 关于探针的靶部位，选在扩增片段的哪一段？对结果也会有影响。请慎重考虑。    

3. 关于内参的选择和使用。有些研发者没有设计；有的仅仅设计了外参。建议必须有内参。   

4. 关于检出限，大概在10至1000Copies/ml之间。请尽可能降低检出限，因为分泌物和灌洗液等标本中病毒的拷贝数可能较少，为了提高检出率，就必须尽可能地降低检出限。同时，在可能的情况下，建议研发者尽可能考虑扩大产品适应的标本类型。   

5. 关于试剂盒的灵敏度和特异度。由于在研发的时候很难获得真实的阳性标本，灵敏度和特异度，特别是灵敏度的估计可能并不很准确，因此，在可能的情况下，最好能够争取有“实战”的结果。    

6. 关于方法学的设计。多数采用的是rRT-PCR,也有采用等温扩增的方法。在尽可能缩短检测时间的同时，请关注检测性能的变化和影响，相比而言，检测性能最为重要。有采用试纸条层析等方法的构思，请考虑检测体系的封闭性！因为试纸条层析的方法通常阅读窗是开放的，对于新型冠状病毒这样一个高度传染性的标本，开放设计肯定是不可以的，当然，为了防止核酸扩增片段的污染，也不能采用开放式设计。如果为了使用方便，设计成POCT产品，也请注意检测体系的封闭性。   

7.关于研发和生产核酸检测试剂的条件和经验。有的研发者是纯科研单位的，没有中试和生产经验；有的研发者过去是生产免疫试剂的，没有研发生产核酸检测试剂的经验；有的研发者虽然有生产基地，但是没有取得过检验试剂生产许可证书……总之，研发者的热情可嘉，但优势参差。为了提高产品质量并尽快产出高水平的产品，建议强强联合，优势互补，合作共赢。  

以上建议供同道们参考，说得不对的地方请批评指正。 

收稿日期：2020-02-10