对于测定血清中或者最小量Apo(a)的 血浆中Lp(a)的试剂盒评价

Lp(a)在肝脏内合成的复杂大分子结构的物质。它具有一个胆固醇磷脂的核心和一个密切相关的蛋白质apoB100，因此它与低密度脂蛋白（LDL）相似。Lp(a)与LDL又有不同，它在每个脂蛋白颗粒里都含有通过一个共价双硫键连接的糖化载脂蛋白(a)（Apo(a)）和Apo（B）100【1】。据研究表明，血浆中脂蛋白小a的水平升高与冠心病有关。【2】【3】 一项研究表明，血浆中Lp(a)和载脂蛋白(a)的水平升高增加了小儿动脉缺血性卒中复发的危险。【4】此外，Apo(a)和纤溶酶原的结构相似性使得其在动脉粥硬化和血栓形成中具有重要的作用。【5】~【7】载脂蛋白(a)个体内和个体间大小的异质性是由基因决定的，这对于血浆中Lp(a)的免疫组化测量是一种挑战。五点校准的方法在每一个水平都考虑到Lp(a)的异质性，这减少了检测结果的差异性。这项研究报告是关于Lp(a)在血清中或者具有最小Apo(a)量的血浆中的测量，使用的方法为免疫比浊法，并研究了其性能特点。这项方法广泛适用于各类自动化系统，同时包含了液体即用的稳定试剂，它使测量的应用设置更加方便易用，简化了测量程序，有效避免人工失误。

免疫比浊法中，样本中的Lp(a)与吸附在乳胶颗粒上的抗Lp(a)抗体之间发生了抗原抗体反应，产生了凝聚。凝聚在700nm的吸光度与样品中Lp(a)的浓度成比例关系，这可便于检测。试剂是稳定即用，Lp(a)的校准和质控，血脂类的质控都来自英国朗道实验诊断有限公司（Randox Laboratories Limited, Crumlin, UK)。该方法广泛适用各类临床生化分析仪，本实验采用了来自英国朗道实验诊断有限公司的RX Daytona plus 分析仪。

检测范围

免疫比浊法的可检测范围为3 ~ 106 mg/dL.

灵敏度

定量限、检测限和空白限都与CLSI指南的EP17-A一致（见表1）

表1 使用免疫比浊法在RX Daytona plus上检测Lp(a)的灵敏度

前带

在Lp(a)接近493 mg/dL才注意到抗原过剩的影响

批内精密度和总精密

批内精密度和总精密度表示为CV(%)，分别小于4.00和4.5（参见表2）

血浆和血清内的对比

该法用于比较血清和血浆样本（n=56）。血浆样本在试管中收集同时含有肝素钠肝素锂、肝素钠、EDTA、EDTA或柠檬酸钾。该数据进行线性回归分析，在所有情况下的相关系数（r）大于0.996。

表2 使用免疫比浊法在RX Daytona plus上检测Lp(a)的精密度

Lp(a)的结构与LDL的相似，但由于其分子内含有糖化Apo(a)并与ApoB-100通过二硫键相连，这又是其与LDL的不同点。血浆中Lp(a)水平的升高与冠心病的关系已经被报道。一项研究表明，血浆中Lp(a)和载脂蛋白(a)的水平升高增加了小儿动脉缺血性卒中复发的危险。载脂蛋白(a)个体内和个体间大小的异质性是由基因决定的，这对于血浆中Lp(a)的免疫组化测量是一种挑战。该项研究报告是关于Lp(a)在血清中或者具有最小Apo(a)量的血浆中的测量，使用的方法为免疫比浊法，并显示了最佳检测性能。该实验使用了液体即用的稳定试剂，使得检测设定更为简便，有效消除人工失误。它可广泛适用于不同的自动化分析仪并能保证稳定性，检测的准确性和测试程序的简便性。它是一项方便临床研究的优秀分析工具。

参考文献

1.Utermann G., Weber W. Protein composition of Lp(a) lipoprotein from human plasma. FEBS Lett. 1983, 154: 357-361.

2.Bennet A., Di Angelantonio E., Erqou S., Eirikdottir G., Sigurdsson G., Woodward M., Rumley A., Lowe G.D., Danesh J., Gudnason V. Lipoprotein (a) levels and risk of future coronary heart disease: large-scale prospective data. Arch. Intern. Med. 2008, 168: 598-608.

3.Emerging Risk Factors Collaboration, Erqou S., Kaptoge S., Perry P.L., Di Angelantonio E, Thompson A., White I.R., Marcovina S.M., Collins R., Thompson S.G., Danesh J. Lipoprotein(a) concentration and the risk of coronary heart disease, stroke, and nonvascular mortality. JAMA. 2009, 302: 412-423.

4.Goldenberg N.A., Bernard T.J., Hillhouse J., Armstrong-Wells J., Galinkin J., Knapp-Clevenger R., Jacobson, L., Marcovina S.M., Manco-Johnson M.J. Elevated lipoprotein(a), small apolipoprotein (a), and the risk of arterial ischemic stroke in North American children. Haematol. 2013, 98: 802-807.

5.McLean J.W., Tomlinson J.E., Kuang W.J., Eaton D.L., Chen E.Y., Fless G.M., Scanu A.M., Lawn R.M. cDNA sequence of human apolipoprotein(a) is homologous to plasminogen. Nature. 1987, 300: 132-137.

6.Tate J.R., Rifai N., Berg K., Couderc R., Dati F., Kostner G.M., Sakurabayashi I., Steinmetz A. International Federation of Clinical Chemistry standardization project for the measurement of lipoprotein(a). Phase I. Evaluation of the analytical performance of lipoprotein(a) assay systems and commercial calibrators. Clin Chem. 1998, 44: 1629-1640.

7.Hajjar K.A., Nachman R.L. The role of lipoprotein(a) in atherogenesis and thrombosis. Annu Rev Med. 1996, 47: 423-442.

英国朗道实验诊断有限公司   供稿