尿液混合细胞群的发现及临床意义
【摘要】目的?本试验的主要目的是检测尿液沉渣涂片中的一种特异细胞团，我们将其命名为尿液混合细胞群（Mix Cell Cluster），简称MCC，并对其在不同疾病中的阳性率进行了调查研究，探讨其在临床诊断中的意义。方法?观察596例数种疾病患者尿液沉渣，计算其MCC出现率，并通过细胞荧光染色和瑞-姬氏染色的方法阐明MCC与其它普通白细胞团的区别以及MCC的细胞组成。同时对MCC检出与白细胞检出和尿液细菌培养检测结果间的相关性进行了分析。结果?在有、无临床症状的急性肾盂肾炎患者尿中的MCC阳性检出率分别为87.6%和87.5%，在有、无症状的慢性肾盂肾炎患者尿中的MCC阳性检出率分别为96.2%和97.1%，与肾小球肾炎、膀胱炎、尿道炎等疾病中的MCC检出率具有显着统计学意义。形态学方法观察发现MCC由多种细胞聚集形成。结论?MCC是一群细胞聚集黏附成团的细胞群体，对泌尿系感染部位来源的鉴别及肾盂肾炎的诊断，尤其是对肾盂肾炎的鉴别诊断具有重要的临床意义。
【关键词】尿液混合细胞群；尿液沉渣；肾盂肾炎
尿液沉渣中的细胞形态千变万化，每种细胞的细微变化均可为临床提供新的信息、预示着泌尿系统的变化[1]。尿液中白细胞是最常见的细胞之一，它主要与泌尿系统感染等密切相关，然而对于不同的疾病，不同的感染部位，它的形态是否相同？我们通过多年对尿液沉渣的观察，发现白细胞在不同的疾病中，形态会有一些细微的差别，对于临床诊断具有重要的提示作用。这里主要介绍我们在尿液中发现的一种特殊的细胞集团，由于其包括中性粒细胞在内的多种有核细胞黏附聚集成团的细胞群体，我们将其命名为混合细胞群（MCC），并探讨MCC的检出对上尿路感染诊断、鉴别诊断的特异性和临床意义。目前对MCC形成机制尚在进一步研究之中。
材料和方法
一、研究对象
1. 实验组：本研究共观察我院泌尿外科、肾内科2002.01-2007.06期间的住院患者尿液沉渣涂片596例，男性患者157例，女性患者439例，平均年龄(51±8)岁，其中出现尿频、尿急或尿痛等尿路刺激症状患者373例，无临床症状患者223例。经过X线肾盂造影显示异常改变的确诊为急性肾盂肾炎患者106例；经X线肾盂造影证实肾盂肾盏变形、肾影不规则甚至缩小的确诊为慢性肾盂肾炎患者156例，均有一年以上的尿路感染病史；经B超检查、前列腺液检查证实及X线肾盂造影无异常改变的确诊为前列腺炎患者8例；经膀胱镜、尿道镜、CT扫描、MRI检查及X线肾盂造影均无异常改变确诊为膀胱肿瘤患者18例，输尿管肿瘤患者3例，肾盂肿瘤患者4例，膀胱炎患者112例，尿道炎患者96例；经肾脏活检及X线肾盂造影无异常改变确诊为肾小球肾炎患者93例。
2. 对照组：正常对照组262例均来自我院体检健康者, X线肾盂造影均无异常改变，其中男102例，女160例，平均年龄(51±8)岁。
二、方法
1. 尿液沉渣涂片观察：取患者新鲜中段晨尿10ml经1500r/min，5min离心，弃9.5ml上清液，留取0.5ml尿液混匀，取o.1ml沉渣涂片，每例标本涂三张沉渣片，用低倍镜全片检查寻找可疑的MCC，再分别用吖啶橙荧光素和瑞-姬氏染色确定，若全片仅1个MCC亦按阳性计算。
2. 各对比项目试验方法：(1)细菌培养计数：于无菌容器内，留取新鲜中段晨尿30ml，作细菌培养计数，以活菌数>105/ml为阳性。 (2)荧光素细胞染色法采用吖啶橙渗入法[2]：取沉渣涂片自然干燥后用无水乙醇固定15ml，用0.15ml，PH6.0的PBS滴于已固定的沉渣细胞涂片上，平衡30sec，晾干，加0.01%吖啶橙缓冲染色液布满已平衡的涂片上，置湿盒内， 37℃恒温孵育15min；用0.15mol/L，7.4 PBS冲洗3次，再用0.1mol/L氯化钙分色40sec，缓冲液冲洗后，以50% 0.15mol/L，PH6.0 PBS－甘油混合液封片，荧光镜下观察。（3）瑞-姬氏染色：将尿沉渣片晾干，甲醇固定15min，用姬瑞氏染液对制好的尿沉渣片染色5min，显微镜下观察。(4) 白细胞计数：显微镜高倍镜下观察，白细胞>10/HP为阳性。
3. 统计学分析：SAS统计软件对实验数据进行X2检验。
结果
一、形态学观察：
1. 混合细胞群在高倍光学显微镜下显示为聚集黏附成团的细胞群体，可见群体外围疑似有膜状物包裹，呈圆形或椭圆形，形状较为规则，细胞间结合紧密，部分融合（图1）。采用吖啶橙渗入方法可清晰的分辨出细胞的形态，荧光强度较单个的细胞强并能发现各细胞的胞膜不规则，胞浆丰富，各细胞间紧贴，并呈圆柱状有规律的排列（图3），经瑞-姬氏染色后观察，可见多种细胞聚集，其中包括中层移行上皮细胞，底层移行上皮细胞、淋巴细胞、巨噬细胞及中性粒细胞等（图4）。
2. 非尿液混合细胞群的白细胞团块在高倍镜下，细胞间结合较疏散，多通过粘液丝粘连在一起，多数粘连着细菌等其它杂质，形状不规则，外围未见膜状物包裹（图5，6
