空白限、检出限、定量限，一文帮您梳理清楚
借机学习一下LoB、LoD、LoQ
发现问题
查看反应曲线
我认为：对于生化人，查看反应，从中发现问题是我们必备的检验技能。于是带学生一起查看该患者该项目的反应曲线；并顺手查看某一PA正常的反应曲线（用于比较）。 该患者PA负值的反应曲线：
任一PA正常的反应曲线：
该项目使用的是免疫比浊法：试剂1主要 是Tris缓冲液，因此添加试剂1之后一般呈一条稳定的直线；而试剂 2 为羊抗人前白蛋白抗体，是启动反应的有效成分，添加试剂 2 之后才有明显的反应曲线变化。
倍比稀释
注：101-105为用生理盐水进行倍比稀释；201-205为用蒸馏水进行倍比稀释。均没有出现浑浊，且结果均为负值。反应曲线如下：
查看标本
可见：患者血清无明显的溶血、脂血、且其胆红素含量也正常。
再看反应曲线
我们的体系，一些很低的结果，因为占比的原因，有时会容易导致看错的曲线。参照生化地带2022-11-17的小文《要看曲线；并且要认真看》。 所以这次我联系我们仪器的工程师，在工程师的指导下，翻看了该患者原倍反应的反应曲线，重点关注加了试剂2之后的吸光度。
吸取之前犯错的经验教训，我和仪器工程师，一致认为这里可能基本没有反应，应该是一个PA 很低的标本。
请教工程师
借机学习一下LoB、LoD、LoQ
空白限（limit of blank，LOB）是指在规定的可能条件下，空白样本被观察到的最大检测结果。 检出限（limit of detection，LOD）是指检测方法可检测出的最低被测量浓度，也称检出低限或最小检出浓度。 定量检出限（limit of quantitation，LOQ）是指在规定的可接受精密度和正确度条件下，能定量测出样本中分析物的最小量。 LOB、LOD、LOQ三者之间的关系见下图，通常情况下，LOB<LOD≤LOQ。
空白限的建立与验证
1. 试验准备：对于建立LOB，原则上需要60次测量；对于验证LOB，则只需要20次测量。准备好空白样本，空白样本尽量来自于临床病人样本，设法除去被测物。 2. 空白限的建立：至少60次空白样本测定，如果空白样本测定结果符合高斯分布（正态分布、对称分布），计算公式：LoB=μB+1.645σB，其中μB和σB分别表示空白检测的平均值和标准偏差。 3. 空白限的验证：测定一个空白样本20次，不超过3个测定结果大于LOB，验证通过。
检出限的建立与验证
1. 试验准备：同上。 2. 检出限的建立：至少60次低浓度样本测定，其浓度在LOB～4LOB之间，计算其标准偏差SDs。如果样本测定结果符合高斯分布（正态分布、对称分布），计算公式：LOD=LOB+cβSDs，其中cβ=1.645/（1-1/4×f），f为SDs的自由度。 3. 检出限的验证：首先验证LOB是否符合要求；再选择被测量值等于LOD的样本，获取至少20次测量结果。计算大于LOB的测定结果所占比例是否符合要求。如符合要求，则验证通过。
定量检出限的建立与验证
1. 定量检出限的建立：检测系统能够得到可靠结果的被测物最低浓度，其总误差符合实验室的要求。计算LOD处的总误差。如果LOD处的总误差符合实验室的要求，则LOQ=LOD。如果LOD处的总误差大于实验室要求，则选择浓度大于LOD的样本进行40次的检测，并计算总误差，如果新计算的总误差符合实验室要求，则该浓度为LOQ，如果不符合要求，则继续提高样本浓度，直至总误差符合实验室要求。 2. 验证定量检出限：选择被测样本值等于LOQ的样本，至少25次测定，每个样本测定结果与参考值的偏差与实验室允许的总误差相比较。计算小于允许总误差所占比例是否符合要求。如果符合要求，则验证通过。
重视这三个LO
在平常的工作中，对于检测上限的关注度高于检测下限，但是检测下限对检验结果也是至关重要的，对于低于定量下限的数值，其准确性不高，需对其特别关注进行处理。 通过以上小结，我大致认为：①空白样本能被检测的信号的最大值叫LOB；②被测物质能检出信号时最低浓度是多少，只检出信号，不保证质量，叫LOD；③能保证检验质量（精密度、正确度达到需求）的测得到的最低物质浓度，叫LOQ。
