看生化反应曲线到底多重要？

前情提要

目前生化检验工作中自动化分析仪的应用十分普遍，既提高了工作效率又便于生化检验标准化，大大推动了生化检测的发展。而在全自动生化检测中，反应曲线分析是每一个检验人员应该必备的技能。通过反应曲线可快速有效地查找检测过程中误差、失控产生的原因，然后有针对性地找到解决问题的方法，从而保证检验结果的准确，有效。

这不，通过分析反应曲线，我们又解决了一个问题：

案例分析：今日审核患者结果时发现，LP(a)结果出现较多负值，依据过往经验，首先排除标本因素，如标本量过少，血清中有气泡或纤维蛋白原，标本严重脂血等，然而发现这些标本没有这些问题。

进一步分析，查看AU5831检测结果为负值的标本，调取反应曲线，如图1，图2，正常反应曲线如图3。

LP（a）检测方法为两点终点法，反应监测12,27两点吸光度，与正常反应曲线对照，可见结果异常的曲线中，加入试剂2（R2）后吸光度出现不稳定的变化，可出现1-2个小峰，当反应达到平衡，27点的吸光度值若小于12点吸光度值，则检测结果可出现负值，由此考虑反应体系中是否存在干扰因素。

如我们此前案例报道的，因日常工作中常需检测肾内血透患者标本，此类血液标本离体后的凝集过程较缓慢，需几十分钟甚至更长的时间，常表现为反复离心反复血清凝集的现象，故检测过程中较易产生凝块，长期积累有时可粘附杯壁，较难清洗，且易堵塞清洗比色系统的抽取废液的探针或管路。另一方面，生化管中存在分离胶，离心不当有时可造成溶胶，凝胶亦可粘附杯壁及造成抽取废液的探针或管路堵塞。遂首先观察比色杯是否异常，查看检测结果为负值的LP（a）所使用的比色杯，比较同一比色杯检测的不同项目是否出现相同的曲线异常，如图4，图5，图6。

如上图，通过比较可见，同样使用201号比色杯，LP（a）曲线异常，而ALP和CHO曲线正常，其他比色杯亦只有LP（a）检测异常，由此可排除比色杯因素造成检测结果为负值。

既然不是比色杯异常影响比色，则进一步分析考虑是否为光源不稳定产生干扰。LP（a）检测为单波长，所用波长为600nm，故重点观察600nm附近检测波长的项目，通过比较可知，TG（如图5），主波长为660nm，CHO（如图6），主波长为540nm，两者反应曲线平滑，且其他波长（如340nm等）处的检测项目均未见异常，由此排除光源不稳定造成的检测结果为负值。

排除以上标本及仪器因素的干扰，明确仅有LP（a）一个项目结果异常后，接下来则考虑试剂因素。从异常的反应曲线可见，试剂1加入后曲线无异常，而加入R2后，吸光度出现不稳定变化，故推测干扰来自R2试剂，疑R2试剂被污染，于是将R2试剂全部更换，随后进行校准，质控，室内质控结果在控，反应曲线如图7。

更换试剂后，将检测结果异常的标本重新检测，反应曲线恢复正常，结果为正值。

总结

生化检验中项目的检测干扰因素众多，当检测结果出现异常时，如何对问题进行分析处理是每个生化检验人员应具备的能力。反应曲线作为生化反应过程的直观反映，当遇到问题时，我们可以通过分析曲线，查找检测过程中误差、失控产生的原因，从而有针对性地找到解决问题的方法，使仪器尽快恢复正常工作。