ABO血型鉴定实验的室内质控方法探讨
血型鉴定是一项具有高度科学性和高度责任性的工作，是献血者血液检测的重要项目，鉴定结果正确与否，直接影响输血安全。《血站实验室质量管理规范》要求，应建立与检测项目相适应的室内质量控制程序，卫生部对血站实验室的督导检查中，要求对血型实验进行常规质控，以进一步提高血型实验的准确性。目前，生化实验、免疫学实验的室内质控，有较为成熟的理论和方法，而血型实验的室内质控如何进行，未发现有具体的规定和方法。为此，笔者结合本单位工作实际，对血型实验的室内质量控制方法进行了探讨，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象
2009年1～10月本站无偿献血者血液标本22051份。
1.2 试剂
抗一A、抗一B标准血清(长春生物制品研究所博德公司提供)；ABO试剂红细胞(上海血液生物医药有限责任公司提供)。以上试剂均经中国药品生物制品检定所批检合格，在有效期内使用。
1.3 主要仪器
STAR全自动样本处理系统(瑞士Hamilton公司)；Xantus全自动血型仪(瑞士Xantus公司)；KA一2200细胞洗涤离心机(日本Kubota)；HTⅢ扫描酶标仪(奥地利Anthos公司)；T.S温控孵育振荡器(奥地利Anthos公司)；Labofuge400平板离心机(美国Beck—man公司)；96孔硬质U形微板(丹麦Nune公司)。
1.4 应用软件
Xantus全自动血型仪采用Xantus软件(深圳爱康医疗电子有限公司提供)；Auslab实验室管理软件(北京AUSBIO公司)；现代血站标准管理系统(河北唐山现代软件有限公司)：
1.5 方法
1.5.1 ABO血型试剂的进货 确认每批血型试剂进货后，质控科要进行进货验证。检查项目有：外观检查、效价滴定、特异性检测、亲和力测定。均合格后，试剂才俄熏予使用。
1.5.2 ABO血型实验的室内质控 检验科每日工作前，首先进行血型实验的室内质控。方法是，用抗一A、抗一B标准血清验证A、B、O试剂红细胞，用A、B、O试剂红细胞验证抗-A、抗一B标准血清。操作步骤如下：①取洁净小试管6支，分别标明α+A(抗A+A细胞)、α+B(抗A+B细胞)、α+0(抗A+O细胞)、β+A(抗B+A细胞)、β+B(抗B+B细胞)、β+0(抗B+O细胞)；②用移液器按表1分别加注标准血清及试剂红细胞；③将试管轻轻混匀，置久保田KA2200离心机离心，按键NO.设置为2，离心时间15s；④轻轻摇动试管，重悬细胞扣，观察红细胞是否凝集或溶血；如果未见凝聚或溶血现象，再以低倍镜观察。判读质控结果是否正确，抗A+A细胞及抗B+B细胞应凝集，其余均不凝集；⑤对血型实验的室内质控结果按ABO血型实验室内质控记录表进行记录。
1.5.3 无偿献血者血液标本的检测 血型质控结果正常后，进行献血者血型鉴定实验，并观察实验凝聚效果。ABO血型正定型应用Xantus全自动血型仪进行检测，反定型应用全自动微板法进行检测。
2 结果
2009年1~10月，血型实验室内质控共发现2次异常情况。经进一步研究分析，1次为标准血清异常，因使用中的抗B血清效价降低，致凝集强度下降，影响了凝集效果，更换新的标准血清后，质控结果正常；2次为试剂红细胞异常，均为使用中的试剂接近失效期所致，使用新枇号的试剂红细胞后正常。
通过血型实验的室内质控后，对本站22051份无偿献血者血液标本，进行ABO血型正、反定型，结果均正常，未发生错报血型的情况。
3 讨论
ABO血型鉴定的原理是基于抗原抗体反应所产生的细胞凝集反应，通过正定型(红细胞定型试验)和反定型(血清定型试验)，判定ABO血型。为进一步提高ABO血型鉴定结果的准确性，必须对血型实验进行全面质量管理；包括对血型试剂进行进货验证、搞好库存管理、做好室内质控、制定血型鉴定的标准操作规程并严格执行等措施，而血型实验的室内质控是其中的重要环节。
笔者通过实践认为，血型实验的室内质控应注意以下几个方面：(1)采供血机构一般使用各种自动化仪器设备进行加样、检测，应当对仪器试剂槽中现用的试剂，或准备用于当天实验的试剂，进行室内质控，而不能使用库存的当天不用于实验的试剂进行质控。(2)试管标记应正确，以免误读结果。(3)加样顺序为先加血清，后加红细胞，以免漏加试剂。(4)吸样量准确、离心条件正确。(5)读取结果方法正确，一次只读1支试管，应轻轻摇动试管，仔细观察结果，不能用力过大。(6)质控结果记录表格化，以便标准化、规范化地做好实验记录，便于档案管理。通过进行血型实验的室内质控，可以及时发现不符合质量标准试剂的非预期使用，保证ABO血型结果的准确性。血站检验科在每天工作开始时，应进行血型实验的室内质控，确保为临床提供安全有效的血液及血液制品，进一步提高输血安全水平。
编辑：范伟伟
