酶活性测定的质量保证

                                        陕西省商洛市中心医院检验科     王乾慧 王淑蕊

       随着自动化分析仪在各医院的普及，酶的连续监测法测定已成为临床酶活性测定的常规方法。但在实际工作中，由于所用的仪器种类繁多，试剂盒品种不一，实验室工作人员业务能力的差异等，造成不同实验室间的测定结果差异较大。本文就酶活性测定的质量保证和标准化作一些探讨，现报告如下。  

1、试剂的质量保证  

       1.1  试剂盒的选择  目前酶测定大多使用商品试剂盒，由于酶促反应的影响因素较多，造成各实验室间酶活性结果差异较大。为了提高酶活性测定的准确性和精密度，使酶活性测定结果在方法间、实验室间具有可比性，消除参考范围的多重混乱，国际临床化学联合会（IFCC）提出了多种酶测定的推荐方法。我国检验学会也公布了一些酶的推荐方法。当前酶试剂盒生产厂较多，在选购试剂盒时要仔细阅读试剂盒说明书，对试剂盒所用方法的原理、试剂配方（包括缓冲液、底物、添加剂等）有所了解，选择卫生部临床检验中心推荐的常规方法的试剂盒。有些项目没有推荐常规方法，应该选择公认的测定方法试剂盒。 
       1.2  试剂盒的性能监测    
       1.2.1  试剂盒性能监测的重要性：酶试剂盒有许多生产厂家，不同厂家产品的质量、技术含量等常有区别，有时即使同一厂家不同批号的同种试剂因原料来源、纯度不同以及生产条件变动，会产生批间变异。同一批号的同种试剂盒在储存、运输时的情况有所不同，性能也可能发生变化。因此对购人的试剂盒应进行性能检测，只有质量达到标准方可用于实际工作。 
       1.2.2  试剂盒性能检测的具体方法：总的原则应不低于《卫生部临床检验体外诊断试剂盒质量检定暂行标准》的规定。同项目试剂盒之间作比较，如果稳定性好、线性范围宽、正向型试剂空白吸光度低、反向型试剂空白吸光度高、试剂空白速率低、瓶间差小者可视为优质试剂。  

2、自动生化分析仪的质量保证  

       2.1  加样系统的质量保证  自动生化分析仪在长期使用过程中，因试剂针受腐蚀和管道老化、注射器加样精度下降等，均可导致加样系统的精密度下降，因此必须定期检测加样的准确度和精密度，也可用称量法检测加样的准确度和精密度。根据测定结果查找准确及精密度欠佳的原因，作相应的维护和保养。    
       2.2  摩尔吸光系统繁荣校准  自动生化分析仪测定酶活性是割据摩尔吸光系数计算出酶的活性单位。在实际应用中，不同厂商的不同仪器以及同一仪器的不同时期都使用统一的ε值。文献所载各ε值是以窄光谱、低杂散光的高级分光度计检测所得，而在临床化学检验的实际应用中，分析仪器的干涉或光栅分光的波长宽度常为6~10nm，其检测系统的性能也不一致，因而被检测物质在各仪器上使用时的实际ε值也就不一致，如各仪器都使用统一的ε值计算，则可能导致测定结果的偏差。 

                                                                                        编辑：范伟伟