酶测定中试剂和校准物对溯源的影响

      【摘要】目的 研究试剂和校准物对酶测定溯源的影响。方法 用美国德灵公司生产的DIMENSION RXL 全自动生化分析仪及配套的试剂、校准物作为标准测试系统, 朗道试剂和德灵校准物作为测试系统1, 朗道试剂及配套校准物作为测试系统2, 分别校准后测定新鲜临床标本, 同时进行2 个水平的质控。结果 测试系统2 和标准测试系统产生的回归关系更密切。结论 配套的试剂和校准物能建立更好的溯源性, 非配套的试剂和校准物对测试结果的溯源性会产生负面影响。
      【关键词】溯源性; 校准物; 酶; 试剂

      随着医学技术的发展, 人们对医疗水平的要求越来越高,对临床检验结果的准确, 具有跨时空的比较性有了迫切的需要。为了达到这一目的, 就要确保检验结果的溯源性。所谓溯源性是指通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链, 使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准, 通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性 。ISO17511和ISO18153 对此做出了具体说明。对于医学实验室来说, 选择不同的测试系统会影响相应测试结果的溯源性, 本文通过不同测试系统来分析试剂和校准物对酶测定溯源性的影响, 报道如下。

1 临床资料
      1. 1 测试对象 本院40 例住院患者, 患者血清标本无溶血、无脂血, 并且对临床患者标本的选取标准是尽可能覆盖试剂盒的测量范围 。
      1. 2 仪器与试剂 美国德灵公司的DIMENSION RXL 全自动生化分析仪。DIMENSION RXL 配套试剂和校准物, 郎道试剂和配套校准物及郎道定值人基质正常值质控血清和异常值质控血清。
      1. 3 方法 DIMENSION RXL 配套试剂和校准物组成标准测试系统, 郎道试剂和DIMENSION RXL 校准物组成测试系统1, 郎道试剂和配套校准物组成测试系统2, 采用郎道定值人基质质控血清的正常和异常2 个水平对3 种测试系统进行质量控制, 对3 种系统测试的结果进行分析。
      1. 4 统计学方法 使用统计软件SPSS11. 5 对结果进行方差分析、回归分析及回归系数的检验, 对2 条回归直线进行比较。

2 结 果
      2. 1 3 种测试系统对每个水平质控物连续测定20 次, 取均值, 质控结果见表1。

      2. 2 对3 组质控结果进行方差分析, F = 3. 05、F _{0. 05(2, 56)} =3. 10, 差异无统计学意义( P> 0. 05) 。
      2. 3 对40 例住院患者血清标本分别用标准测试系统、测试系统1 和测试系统2 进行测定, 然后对测试结果进行回归分析和回归系数的检验, 可以看到丙氨酸氨基转移酶( ALT ) 测定的标准系统( X ) 和系统1( Y) 的回归方程为Y= 0. 878X + 3. 957;标准系统( X ) 和系统2( Y) 的回归方程为Y= 0. 990X + 0. 406。对前者的截距、斜率检验结果差异均有统计学意义( P <0. 05) , 表明前者的截距、斜率不为0, 对后者的截距检验结果差异无统计学意义( P > 0. 05) , 斜率检验差异有统计学意义( P< 0. 05) , 表明后者的截距为0, 斜率不为0, 其他项目的回归分析及回归系数检验结果见表2。
      2. 4 对每个测试项目得到的2 个回归方程的关系进行分析,如对碱性磷酸酶( ALP) 在表2 中的2 条回归直线方程Y =0. 845X + 7. 043 和Y= 0. 953X + 7. 256 进行比较, 斜率间检验结果的P< 0. 05, 截距间检验结果的P > 0. 05, 表明2 条直线不平行, 但是具有相同的截距, 其他测定项目的假设检验结果见表3。

3 讨 论
      血清酶测定是临床实验室的常规测定项目, 随着实验室自动化程度的提高, 越来越多的使用全自动生化分析仪, 考虑到配套试剂的高价位、进货渠道及其他一些问题, 基层医院有时不使用非配套试剂。在这样的情况下, 如何保证测试结果能溯源到仪器厂家的标准, 从而进入溯源链 , 就成为很现实的问题。
      本文采用3 种测试系统, 其中标准测试系统由于使用厂家全部配套产品, 具有较好的溯源性, 因此作为实验室的参考测量程序。从表1 可以看出, 3 种测试系统的质控结果均在允许范围, 经方差分析, 3 组质控结果间无显著差异, 说明3 种测试系统的精密度基本一致。
      从表2 的回归分析结果可以看出, 测试系统1、2 和标准测试系统的线性回归是具有统计学意义的, 根据对4 种酶的测试结果回归系数检验可以认为, 测试系统2 和标准测试系统的回归系数更接近1, 表明测试系统2 具有更好的溯源性, 并且其中ALT 和AST 的截距更接近0, 说明测定ALT 和AST 的测试系统2 对标准测试系统的溯源是非常好的。
      为了进一步明确测试系统1 和2 的溯源性, 本文对每个测试项目得到的2 个回归方程的关系进行分析, 表3 中的结果表明, 4 种测试项目的斜率不相等, 回归直线并不平行, 表明测试系统1 和2 对标准测试系统确实有不同的溯源性, 据此再回头分析表2 的结果, 可以认为测试系统2 对标准测试系统的溯源性确实好于测试系统1。
      仔细观察表2、3 中数据还可以发现一个问题, 在表3 中分析结果表明, ALT 和AST 的2 个回归方程的截距相等, 但是表2 中的结果并不支持这一点, 本文分析后根据统计学关于假设检验的定义认为, 表3 中的数据只是表明在取A= 0. 05 时, P> 0. 05 只是表明不拒绝无效假设( 即截距相等) , 并不等于接受截距相等这一结论, 因为此时证据不足, 有可能是样本数量不足所造成, 对于这方面的问题, 笔者将在今后的研究中进一步分析。
      综上所述, 本文可以认为, 配套的试剂和校准物能建立更好的溯源性, 非配套的试剂和校准物对测试结果的溯源性会产生负面影响。

                                                            编辑：范伟伟