革兰氏染色标准操作程序

检验视界网 4231 2011-01-28

  1、目的

  确保染色结果清晰可靠。

  2、范围

  球菌、杆菌和弧菌染色

  3、职责

  临床微生物实验室当班工作人员认真按程序文件操作。

  4、SOP变动程序

  本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员审核、批准和签字:专业主管、科主任。

  5、试剂

  5.1结晶紫溶液

  A液:结晶紫2g

  95%乙醇  20ml

  Β液:草酸铵  0.8g

  蒸馏水  80ml

  使用前24小时将A液Β液混合后,过虑后装入试剂瓶内备用。

  5.2碘液

  碘  1g

  碘化钾 2g

  蒸馏水 300ml

  5.3脱色液:95%乙醇

  5.4复染液

  储存液:沙黄2.5g

  95%乙醇100ml

  应用液:储存液 10ml

  蒸馏水 90ml

  6、工作程序

  6.1待检标本用无菌生理盐水涂片,经自然干燥后用火焰固定。

  6.2加结晶紫液染1分钟,清水冲去染液。

  6.3加碘液染1分钟,清水冲去染液。

  6.4加95%乙醇脱色液,不时摇动约10-30秒钟,至紫色已脱落为至,水冲洗。

  6.5加复染液(伊红),染30秒钟,水冲洗。

  6.6待涂片自然干燥后,油镜镜检。

  7、质量控制

  金黄色葡萄球菌为革兰氏染色阳性,大肠埃希菌为革兰氏染色阴性。

  8、引用表格和文件

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