血细胞分析仪的试剂配制方法
张金生 检验科
王俊英 脑外科
重庆医科大学临床医学院 重庆 400016
引言现今血细胞分析仪在我国医疗单位几乎普遍采用,已成为临床检验的一个主要检查工具。基于技术水平原因，所使用的血细胞分析仪绝大部分是国外产品，试剂也绝大部分为原装进口试剂。每测定一份标本，仪器所使用的稀释剂最少要在20ml以上，另加几毫升的溶血剂、清洁剂、再加上10%-20%各种耗损，这样消耗在试剂上的资金就相对很大。另外在试剂订购、运输、搬运、储存方面都给使用单位带来不小的麻烦。因此我科专门对血细胞分析仪的试剂进行研制，经临床运用获得满意效果。
1 材料和方法
1.1 材料血细胞分析仪、分光光度计、渗透压仪、pH测量仪、电解质分析仪、色谱仪等。分析仪原装试剂：稀释液、溶血剂、清洁剂。过滤盘、NaCL、KCL、Na2HPO4、NaH2PO4、NaHCO3、Na2CO3、草酸铵、NaN3、表面活性剂等等。
1.2 方法 血细胞分析仪的测定原理大多为电阻法，因此其所用细胞稀释试剂应为导电性良好的电解质液体。同时也要考虑细胞的收缩与扩大问题，为了不使细胞扩大到破裂，液体应为等渗或高渗溶液。溶血剂要考虑用什么表面活性剂成分来溶解红细胞，并使对环境污染最小，且能有效保护白细胞。清洁剂要考虑用那一种清洁剂清洗血细胞分析仪管道，且腐蚀管道可能最小。查阅、累积仪器测定RBC,WBC,PLT的各种试剂配方，并归类，这样容易找出3种试剂的各自关系和内在联系。运用你能找到的分析仪器和检测手段，测定你单位的血细胞分析仪原装试剂成分。稀释液：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-等的含量，PH值，渗透压等。溶血剂：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-,Br,NH3,SO32-等的含量，PH值,渗透压,测定出溶血剂溶解红细胞的Hb光谱吸收曲线。清洁剂：K+,Na+,Cl-,Ca2+,Mg2+,P,HCO3-,Br,NH3,SO32-等的含量，PH值,渗透压等.
1.2.1 试剂配制根据上面步骤的分析,和累积的试剂配方资料,推算出稀释液的主要的缓冲体系和浓度并配给适当的电解质成分,使配出的试剂在PH,渗透压、导电性等方面与原装稀释液非常相近，而后调入适当的防腐剂。对于溶血剂要判断出表面活性剂的种类(可通过色谱仪或溶解红细胞的Hb吸收曲线帮助判断),并通过试验获得表面活性剂的浓度.清洁剂用配制好的稀释液加入适量的相关表面活性剂或成品洗涤剂构成,要考虑对分析仪管道和感应器的腐蚀情况.在以上基础上,根据渗透压、PH值和电解质逐渐调整配方,使之与原装试剂相仿,最后定下配方,按方配制.
1.2.2 试剂过滤所配试剂的用途为血细胞分析,过滤设备应比较精细,试剂中的粒子直径应小于0.5um这样才能测定血小板,以达到测定血小板的准确性[2].
1.2.3 试剂分装根据需要B将各种试剂按不同的容量分装,以便使用和运输.
2 结果 按以上方法和步骤配制出的试剂B能够保证与分析仪测定参数相匹配[3],保证细胞脉冲结果一致性和稳定性,使自配试剂在Hb吸收光谱、WBC对比分类对照、相关性方面均有满意结果，参见文献[4,5]。自配血细胞分析仪试剂在成分、基本理化指标与该仪器原配试剂基本一致状况下，自配试剂可替代进口血细胞分析仪试剂运用于进口血细胞分析仪。
3 讨论 根据血细胞分析测定原理,配制出的稀释液、溶血剂、清洁剂在导电性能、渗透压、PH等理化性质方面都与原装进口试剂相仿,且无损坏血细胞分析仪管道系统,感应系统的化学成分,就不会对血细胞分析仪造成损坏;再则现在试剂供应商提供的试剂，也不能保证全都是原装进口试剂，自我配制的试剂，已出现在供销市场，在这种情况下应当自己给自己一个机会，运用自己的知识，发挥自己的才干，找出血细胞分析仪几种试剂的内在联系，从简单的稀释液入手，逐渐找到配制试剂的方法和信心，再顺序进入溶血剂的配制，清洁剂的调配，找出合适的防腐剂。在解决一个一个的问题后，会出现创造和开发的快感，同时也为你所在的集体，解决了试剂订购、运输、搬运、储存方面的困难[6]。又节约了大量的资金,并且配制的试剂,在分析仪上使用,无需调整仪器测定状态而直接运用.
参考文献：
[1] 杨水云 戴建国 赵文明 制备等密度细胞悬液的简便方法 第四军医大学学报 1999;20(1):84-85
[2] 溪茜 孟颖 SYSMEX F-800血细胞计数仪与显微镜目测计数血小板比较 第四军医大学学报 1999;20(6):471
[3] 吴红 吴道澄 李晓哗 骆文博 血红蛋白交连联剂双_(3,5-2溴水杨酸)丁二酸脂的合成 第四军医大学学报1999;20(8):722-722
[4] 张金生 黄天禄 李胜发AC-920自动血细胞分析仪溶血剂的研制和应用 重庆医科大学学报 2000;25(1):73-76
[5] 祝继华 邱大为 肖勤 自制AC-920型血细胞稀释液的应用和观察 重庆医科大学学报 1999;24(1):83-85
[6] 吴海萍 顾杨 徐峰倩 马少勤 刘美英 自动喷淋消毒箱的研制及应用 第四军医大学学报1999;20(8):S28-S29
