血红蛋白电泳分析
1．原理：带电荷的Hb分子，在一定的缓冲液中，在电场的作用下其移动的方向及速度取决于Hb分子表面所带的电荷的性质，PＨ８以上缓冲液中各种Hb分子均带负电荷，通电时向阳极泳动。如果Hb分子结构异常使等电点发生变化，其泳动速度与正常Hb不同，借此可与正常Hb鉴别。
2．试剂：
2．1 （浸膜液）TEB PH8.5缓冲液：溶解10.2克Tris ，0.6克EDTA-Na及3.2克硼酸于1000ML水中；
2．2 （电泳液）PH8.5硼酸缓冲液：将硼酸5.56克与硼砂（四硼酸钠）6.87 克溶解于1000ML水中。
2．3 0.5%丽春红染色液：丽春红S 0.5克；三氯醋酸3克；加DW至100m。
2. 4 脱色液：3％冰醋酸溶液。
2. 5 四氯化碳。
3. 操作：
3. 1 血红蛋白液的制备：取抗凝血2－3毫升用生理盐水洗涤三次；再向洗涤的压积红细胞中加入等体积的DW和0.5体积的四氯化碳，剧烈振荡3分钟使其彻底溶血，离心取上层血红蛋白液备用。此液浓度约为10％。
3. 2 将醋酸纤维膜切成3×8cm置于PH8.5TEB缓冲液中浸泡10－30分钟。
3. 3 点样：取出浸泡后的醋酸纤维膜用滤纸吸去多余的液体找出毛面，用点样器将5％的血红蛋白液点在距阴极端1.5cm处。
3. 3用电压200~250v或105v，电泳时间25－30分钟，取出电泳膜用丽春红染色数分钟后，用3％醋酸溶液漂洗至底白色，滤纸吸干后肉眼观察结果。
4. 结果：正常人可见HbA ,HbA2二条血红蛋白区带和二条非血红蛋白区带，新生儿可见小量HbF。
5. 正常参考值：正常成人:HbA 96.5~97.5%,HbA2 :2.5%~3.5%。
6. 注意事项：避免人为血红蛋白污染，Hb浓度最好准确，电泳时间不宜过长，并控制电压不能过大。
7. 临床意义：检测血红蛋白量的异常（各型地中海贫血）和各种异常Hb病。
