含肝素中和剂的纤维蛋白原（Fg）功能法试剂的临床应用探讨
摘要：目的：探讨含肝素中和剂的纤维蛋白原（Fg）功能法试剂的临床应用。方法：选取三十名自愿者，分别用肝素抗凝真空采血管和枸橼酸钠真空采血管，抽取合格血样，以2500rpm离心15分钟制成乏血小板血浆备用。应用色彩终点法试剂------添加肝素中和剂，手工法分别测定肝素抗凝血样及枸橼酸钠抗凝血样中的纤维蛋白含量；应用试剂-----未添加肝素中和剂，手工法测定枸橼酸钠抗凝血样中的纤维蛋白含量。结果：两种试剂所测得的纤维蛋白原结果极为接近，经统计学分析，两种试剂测得的纤维蛋白原结果无显着性差异。添加肝素中和剂的试剂测定的两种抗凝剂的抗凝血样得到的两种纤维蛋白原结果，与未添加肝素中和剂的试剂测定枸橼酸钠抗凝血样得到的纤维蛋白原结果之间皆高度相关，其测得的两种纤维蛋白结果之间也高度相关。结论：应用加入肝素中和剂的纤维蛋白原测定试剂，既可以应用于枸橼酸钠抗凝血样，又可以应用于肝素抗凝血样以及各种原因所致的血浆中肝素浓度较高的血样。
关键词 纤维蛋白原功能法测定 冯-克劳斯法
纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）是一种主要的血浆糖蛋白，其水平与凝血、肿瘤、心血管疾病以及血栓性疾病密切相关，准确的测定人体中纤维蛋白原含量，对血栓和出血性疾病患者的临床诊断与治疗、预后观察等具有重要意义，血栓纤维蛋白原含量测定是血栓与止血及溶栓监测的常规试验之一，在临床上倍受重视。冯-克劳斯（Von-Cluass）法属功能性纤维蛋白原定量测定方法，其操作简单、快速，亦可达到一定精密度和准确度，是美国国家临床检验标准化委员会（NCCLS）和卫生部临床检验中心推荐的常规测定方法［1］。但冯-克劳斯法测定血浆纤维蛋白原时肝素可通过多种途径抑制凝血酶活性，尤其在器官移植和大剂量肝素治疗的病人，易造成纤维蛋白原结果假性偏低。为此，我们新研制的添加了肝素中和剂的色彩终点法纤维蛋白原测定试剂，既可用于肝素抗凝血和枸橼酸钠抗凝血的纤维蛋白原定量测定，也可用于血液流变学测定标本的纤维蛋白原定量测定，现介绍如下。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1试管?肝素抗凝真空定量采血管：福州长庚医疗器械有限公司生产，批号为060527；0.109mol/L枸橼酸钠抗凝真空定量采血管：福州长庚医疗器械有限公司，批号为060816。
1．1．2血浆?随机选取30名自愿者，每位志愿者用肝素抗凝真空采血管和枸橼酸钠抗凝真空采血管（抗凝剂与血浆比例为1：9）各抽取合格血样一份，以2500rpm离心15分钟制成乏血小板血浆备用。
1．1．3 试剂?两种功能法纤维蛋白原测定试剂均为南京军区福州总医院研制的色彩终点法纤维蛋白原定量测定试剂。试剂1(添加了肝素中和剂)适用于肝素抗凝血样及枸橼酸钠抗凝血样，批号为20060923，试剂2(未添加肝素中和剂)适用于枸橼酸钠抗凝血样，批号为20061018。
1．1．4 器材?定量加样器为Labsystems公司生产，使用前经称重法较正，水浴箱温度控制在 37℃±1℃之内，所用试管均为聚乙烯塑料试管。
1．2 方法
1．2．1操作方法 肝素或枸橼酸钠抗凝血浆0.1ml,加0.05mmol/L咪唑缓冲液0.9ml,加0.02ml色彩凝固指示物，混匀吸取0.2ml放于透明塑料试管中，放37℃水浴2分钟，加凝血酶0.1ml，同时计时，反应体系由棕兰色混浊变清同时出现黑色凝球或颗粒为终点。记录时间查曲线或浓度表得出纤维蛋白原浓度。
1．2．2标准曲线 用试剂盒内提供的纤维蛋白原标准品（2.95g/L）进行标准曲线绘制。试剂1的回归方程为y=1.79-1.4x，r=0.999，线性范围为0.74 g/L～4.92 g/L；试剂2的回归方程为y=1.64-1.2x，r=0.993，线性范围为1.48 g/L～4.92 g/L [y：lgFg（g/L）x ：lgT（s）]。
1．2．3准确性和精密度测定 用试剂1测定三名志愿人员（低值、正常、高值各一人）肝素抗凝血样各一份，用试剂2测定同样三人枸橼酸钠抗凝血样各一份，每份测定10次，分别求其平均值（x）、标准差（s）和变异系数（CV%），并对两种试剂测得的纤维蛋白原结果进行t检验。（枸橼酸钠抗凝血中抗凝剂与血浆比例为1：9，将试剂盒1测定肝素化血样得到的纤维蛋白原结果乘以9/10，以便与试剂2测得的纤维蛋白原结果进行比较）
1．2．4相关性测定 用试剂1分别对30份肝素血样和30份枸橼酸钠抗凝血样中的纤维蛋白原含量进行定量测定；用试剂2对30份枸橼酸钠抗凝血样中的纤维蛋白原含量进行定量测定。对得到的三种纤维蛋白原结果分别进行两两相关性分析。
2 结果
2．1准确性和精密度 两种试剂对三份标本纤维蛋白原测定结果的比较见表1。 对两种试剂测定三份标本得到的平均值进行t检验，得t1=1.56，P1＞0.05；t2 =1.38，P2＞0.05； t3 =1.30，P3＞0.05。从表1的结果显示，在高、中、低值三份纤维蛋白原含量标本的测定中，两种试剂所测得的纤维蛋
