白色念珠菌快速鉴定培养药敏试剂盒操作流程

检验视界网 4134 2013-04-18

一 、操作步骤
       1、取一支分装的干粉培养基,在无菌条件下打开盖子,加入1.5ml(或30滴)超纯水,完全溶解后,在药敏板阴性孔(C-)中加入50μl培养液。
       2、接种:将处理后的标本加入培养基中充分震荡混匀后,各吸取50μl加入c+孔及剩余药敏板各孔中,盖上药敏板盖。
       3、将剩余培养基连同药敏板一起置于35℃孵箱培养,24小时后观察结果。

 

二、标本采集和处理
(1)妇科标本:
采集: 首先擦去阴道口多余粘液,再用无菌棉签在阴道内旋转1~2次取分泌物。
处理:建议将采集到的标本用1.5ml生理盐水充分稀释取50-100μl,加入培养基。
(2)男科标本:
分泌物:用无菌棉签在包皮内侧或阴茎沟部捻转2~3次取分泌物,直接加入培养基。
前列腺液:由临床医生进行前列腺按摩术采集,用无菌容器收集,取50μl-100μl加入培养基。
(3)痰标本:清洁口腔后,取深部痰液,用无菌容器收集;用接种环挑取1-2环无凝块痰液直接加入培养基中充分震荡混匀。
(4)皮屑标本:
病损部位刮取皮屑或分泌物,用无菌容器收集,直接加入培养基。
(5)粪便、尿液及血液标本:经细菌培养后用生理盐水稀释至2麦氏单位,取50μl加入培养基。

 

三、结果判断
1、阳性和阴性判断标准。
       1) C+孔培养基变黄色或黄绿色(且孔底有菌体沉积),为阳性(+);
       2) C+孔培养基不变色或变成黄绿色(且孔底无菌体沉积),为阴性(-)。
2、C- 孔阴性(-),C+孔阳性(+)试验有效,判断余下各孔结果。
3、C- 孔阳性(+),表示污染,试验无效。
4、C- 孔阴性(-),C+孔阴性(-)表明无白色念珠菌生长,余下孔不判断结果。
5、药敏结果判定:
A孔(-)B孔(-)敏感    A孔(-)B孔(+)中敏    A孔(+)B孔(+)耐药

 

四、注意事项
       1、产品在有效期内如出现混浊或已经变色不能继续使用。
       2、本产品采用密封包装,一经打开后,请一次用完。
       3、标本采集操作规范和及时正确接种标本是提高阳性检出率和准确性的关键。
       4、产品遇杂菌污染引起混浊不得报告白色念珠菌阳性,但部分含分泌物较多的样本接种到培养基中可能引起培养基澄清度降低或颜色变化,判断结果时要注意区别。另外,培养瓶里培养液变黄且有菌体沉积,而药敏板阳性孔没有白色念珠菌生长,多为样本没有充分混匀,此结果按阳性判断,必要时可重做药敏试验。
       5、 由于大部分标本是不均一分泌物,可能导致药敏孔接种量不均一,药敏结果不合理(高浓度孔有白色念珠菌生长,低浓度孔没有白色念珠菌生长)。如出现这种情况,请重做药敏实验或弃用此药物。
       6、 严格按说明书使用方法操作。
       7、 使用完的产品请严格按有菌医疗垃圾规定严格处理。

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