体外进化glmS核糖酶具有野生型褶皱但失去辅酶依赖性
已知的独特的核糖酶,glmS核糖酶-核糖开关需要小分子辅酶——葡萄糖胺-6-磷酸盐(GlcN6P)。虽然与其基因调节功能一致,但使用GlcN6P是意想不到的,因为全部其他有特点的自体劈裂核糖酶都使用RNA功能组或二价阳离子进行催化作用。为确定活性部位特点使核糖酶依赖GlcN6P,为评估其是否由无辅酶的祖先所进化,通过体外育种分离无GlcN6P的变体。三个活性部位基因突变足以产生高反应性RNA,使用野生型褶皱,但是使用二价阳离子进行催化,其对GlcN6P不敏感。野生型和突变核糖酶的生化和结晶对比显示少数功能组调整RNA可能是辅酶或可能是阳离子。这些结果说明只有少数突变可对照组织RNA的新型生化活性,因此,与核糖酶分散功能结构相关的族系可能存在。该研究内容详见:http://www.nature.com/nchembio/journal/v9/n12/full/nchembio.1360.html。
摘自定向点金《临床实验室》杂志2013年第十一期
编辑:范伟伟