微生物室探案奴卡菌

作者 | 王艳珠，吕丽娟，何佳琪

单位 | 天水市第二人民医院检验科

奴卡菌生物学特性:

1. 革兰氏染色革兰阳性或不定，无芽孢和鞭毛，菌体呈多向的分枝丝状。

2. 严格需氧，可在普通琼脂上室温或35℃缓慢生长，初代分离常需孵育1周。在不同培养基或培养时间菌落形态差异大，可出现光滑到颗粒状、不规则、皱褶或堆积的菌落。都能形成气生菌丝，使菌落表面出现粉状或天鹅绒样气生菌丝体，菌落有泥土气味。可产生不同的色素，如橙红、粉红、黄色、黄绿、紫色等。

3. 奴卡菌属改良抗酸染色弱阳性。

呼吸内科患者，女，患者于入院前20年因受凉后出现咳嗽、咳痰，无胸闷、气短，无发热、寒战，无胸痛、心悸等不适，间断就诊于当地诊所，给予口服“药物”治疗，上述症状未见缓解。

于入院前2天因受凉后咳嗽、咳痰较前加重，伴有咯血，色鲜红，20ml/日，无发热、寒战，无胸痛、心悸等不适，未行相关诊治，上述症状未见缓解，为求进一步诊治，遂就诊于我院。

临床医生取其肺泡灌洗液送检我科室，微生物室人员处理标本时发现，24小时生长后血平板、麦康凯平板、巧克力平板均未长菌。考虑标本是肺泡灌洗液，我们取出保存的原始标本进行了二次接种。

第二天早上处理标本时，将前后两次接种的情况进行对比，第一次接种的血平板、巧克力平板生长情况如下图所示。

血平板

巧克力平板

菌落生长特点概述:生长缓慢，菌落表面有褶皱堆积，菌落表面出现天鹅绒样或粉状气生菌丝体，菌落有泥土气味。

第二次接种的平板也未见生长，继续生长，观察其生长情况。

这个时候，我们对原始标本涂片革兰染色，显微镜检见到大量如图所示细菌。

细菌形态特点：革兰氏染色阳性、丝状细菌，形态与放线菌相似，但菌丝末端未见棍棒状膨胀，菌丝缠绕成团，形成类似放线菌的颗粒。

结合平板缓慢生长情况，显微镜检形态，我们初步考虑奴卡菌。

微生物室三名工作人员立即进行查阅相关资料。首先，为了进一步确定该菌，进行弱抗酸染色，操作步骤如下:

1.涂片，干燥。

2.石碳酸品红溶液染色5min(不需加温步骤)后，水洗；

3.1％硫酸水溶液，脱色1min后，水洗；

4.亚甲基蓝溶液染色30s，水洗；

5.待干，油镜镜检。

由于科室没有硫酸，我们用1％盐酸代替，镜检结果如下所示。

弱抗酸染色

染色结果：弱抗酸染色阳性。

可疑菌锁定为奴卡菌，我们随即进行了后续鉴定，同时通知临床医生，方便其合理用药。通过查询我们给出的建议是亚胺培南联合阿米卡星使用，具体用药咨询药剂科。

奴卡菌生长缓慢，因此平板生长需要连续监测，菌落表面有天鹅绒样褶皱，可产色素，结合革兰染色法与弱抗酸法可鉴别该菌，该菌可引起急性，慢性化脓肿。

后续鉴定：根据奴卡菌的新鉴定方法与程序，我们对其展开了进一步的鉴定。

鉴定步骤如下：

我们的药敏结果如下：

由此可见，我们的药敏结果模式是SSSR，但后续的生化鉴定实验室条件有限，无法开展，便就此打住了。 

奴卡菌生长缓慢，因此平板生长需要连续监测，菌落表面有天鹅绒样褶皱，可产色素，结合革兰染色法与弱抗酸法可鉴别该菌。该菌常见于免疫功能低下者，如长期使用糖皮质激素、免疫抑制剂的患者，引起单发或多发脓肿，无特异性发热、咳嗽、咳黄痰、胸痛、咯血。

奴卡菌生长缓慢，需要密切结合原始标本涂片染色结果进行鉴定，缩短鉴定时间，方便临床医生诊断治疗。检验人员需要熟练掌握该菌平板生长特点，镜下形态，鉴定流程等知识。

【参考文献】

[1] 李仲兴，郑家齐，李家宏.诊断细菌学[M].香港：黄河文化出版社，1992.277-278

[2] [美]戴维丝.拉荣（DaviseH Larone）.医学重要真菌鉴定指南[M].北京：中华医学电子音像出版社，2016