溶血和生物素对心脏肌钙 蛋白和利钠肽的分析干扰

【内容摘要】近期，有两种干扰被作为患者安全问题引起大家的重视，包括溶血（血红蛋白）和生物素（维生素B7）。国际临床化学联合会心脏生物标志物委员会（IFCC-CB）利用从大多数cTn和NP检测制造商获得的资料，核对了溶血和生物素对于高敏（hs）-cTnI、hs-cTnT、现代和POC cTn检测以及NP检测造成的相关干扰信息。这些表中的信息被用作教育工具，帮助实验室专业人员和临床医生解决与临床表现不一致的心脏生物标志物分析结果。

心脏肌钙蛋白I和T（cTnI、cTnT）和利钠肽（NP；B型利钠肽，BNP；N端-proBNP；NT-proBNP）分别是用于诊断心肌损伤和梗死（MI）及心衰（HF）的主要心脏生物标志物。与所有临床实验室检测一样，有一些外源性和内源性因素会负面干扰cTn和NP检测的分析性能，如果未能鉴别出这些干扰，可能导致对检测结果的临床解读不当。分析干扰对于心脏生物标志物检测特别重要，因为它们被用于做出时间紧急的关键临床决策。近期，有两种干扰被作为患者安全问题引起大家的重视，包括溶血（血红蛋白）和生物素（维生素B7、微生物H、辅酶R）。国际临床化学联合会心脏生物标志物委员会（IFCC-CB）利用从大多数cTn和NP检测制造商获得的资源，核对了溶血和生物素对于高敏（hs）-cTnI、hs-cTnT、现代和POC cTn检测（见表1）以及NP检测（见表2）造成的相关干扰信息。这些表中的信息被用作教育工具，帮助实验室专业人员和临床医生解决与临床表现不一致的心脏生物标志物分析结果。

溶血是造成分析前误差的主要原因之一，据报道占所有标本拒收的40%-70%。此外，大量的溶血样本产生于急诊科收集的标本和很多重症监护室的留置导管。恰当而快速的患者诊疗决策主要取决于cTn结果的准确度。如果超过了溶血阈值，需要重新采集标本，这样会由于缺少客观证据而导致患者护理延迟，医源性损伤、感染和不良临床管理的风险增加。溶血是cTn和NP检测的已知干扰因素，有可能导致假阳性或假阴性结果；两者不均利于单一值或连续值的解读。可以手动（目测、定性评估）或利用生化平台的指标自动（定量或半定量评估）检测溶血样本。后者由于在利用自动化平台评估溶血时实验室内报告结果的可靠性、准确度和标准化方法得到了改进，因此被视为是良好实验室规范的基准。对于溶血阈值较低（＞100mg/dL，即＞1g/L）的检测，据报道不正确发布结果的概率高达76%。并不是所有免疫测定平台或即时检测设备均能够常规执行自动化溶血检测，因此由于目测血红蛋白的主观性，存在潜在的患者安全问题，无法报告准确的cTn和NP结果。另外，如果使用全血作为测量基质，将会忽视溶血问题。

生物素干扰对于实验室来说是一个相对较新的挑战，也是美国食品药品监督管理局（FDA）对临床实验室的警告声明突出强调的。生物素对免疫测定的潜在干扰的研究方法类似于临床实验室数十年来用于探查分析干扰的方法。生物素是一种水溶性维生素，半衰期为8-16h，并取决于肾功能。虽然生物素的消耗有所增加，且由于市场宣传声称更健康、更强健的头发、皮肤和指甲需要更多生物素，导致非处方“超大”剂量（2.5-10mg）的零售显著增加，但适宜摄取量被定为0.03mg/天。此外，人们通常不知道他们所摄取的补充剂已经含有生物素。美国和欧洲正在进行的随机化临床试验，评估300mg/天的生物素剂量对于多发性硬化和其他炎症性疾病患者的作用，结果显示循环血清生物素浓度达到170-700μg/L。由生物素标记的抗体或生物素-链霉亲和素标记的复合物组成的免疫测定，尤其易受很多临床测试的干扰。

从制造商获取的关于cTn和NP检测/平台的分析特异性和干扰数据，分别如表1和表2所示。干扰阈值是指不损害cTn或NP分析结果准确度的最大血红蛋白或生物素浓度。当超出这一阈值时，结果被归类为假性升高或降低，使实验室专业人员能够在明显溶血或可能摄入过量内源性生物素时确定特定检测/平台的性能。制造商在评价和验证干扰阈值时确定了各自的验收标准。表1和表2中的“最终用户溶血评估”一栏是为了帮助执行心脏生物标志物测试的临床实验室人员。如果实验室人员必须在报告或发布cTn结果之前目测评估溶血，则称之为“定性”检测。如果仪器自动评估溶血以防止错误结果并警告实验室人员此结果超出了阈值，则称之为“定量”检测。

表中的生物素干扰数据表明，不管检测配置中是否包含生物素化抗体和/或是否使用了生物素，值得注意的是具有上述任一特征的检测更易受到内源性生物素使用的干扰。如果已知或由于结果与患者的临床症状不相关而怀疑补充高剂量生物素 ，可能的缓解措施是利用另一项不易受生物素干扰的检测再次分析。然而，这种方法并不总是可行的，也可能由于cTn和NP检测缺乏标准化而产生问题。提出的其他措施包括利用链霉亲和素包被的微粒吸附过量的生物素，但在实施之前需要在实验室内进行附加验证。

心脏生物标志物检测，像大多数临床实验室检测一样，在某种程度上易受内源性和外源性干扰，从而导致不正确的分析结果。尤其需要关注hs-cTn和NP检测的干扰，因为它们被普遍用于在临床紧急情况下指导重要的临床决策，但在这种情况下通常没有那么多时间仔细考虑潜在的分析问题。对于cTn检测，健康人第99百分位数的分析灵敏度和不精密度极其重要，近期发表的文章也强调了溶血和/或生物素使用导致第99百分位或接近第99百分位值附近的假阴性或假阳性结果的后果。虽然诊断急性MI、缺血或心衰时总会结合患者的临床背景，但也应提高对这些检测干扰问题和解决方法的认识，避免不良事件发生。

编译：王小茜

审校：李卫东