流式荧光技术在ToRCH筛查中的应用

ToRCH与优生优育

我国是出生缺陷发生率较高的国家，总发生率约为11%[1-3]，这影响着出生人口素质，劳动力素质以及国家竞争力。出生缺陷给家庭带来沉重的负担和精神压力，严重影响家庭的幸福和谐。

ToRCH是指可导致先天性宫内感染及围生期感染而引起围生儿畸形的一组病原体，是由弓形虫（Tox），风疹病毒（RV），巨细胞病毒（CMV），单纯疱疹病毒I型和II型（HSVI/HSVII）的英文首字母缩写而成。ToRCH病原体是国际上公认的危害孕妇和新生儿健康的重要因素之一，会造成孕妇早产、流产、死胎，胎儿宫内发育不良、先天畸形及新生儿疾病[4]，因此ToRCH的筛查对于优生优育有重要参考价值，有助于减少不良妊娠结局和降低出生缺陷率，被临床广泛认可和使用，主要针对孕前孕中妇女及新生儿。

流式荧光技术在育龄期妇女ToRCH筛查中的应用

育龄期妇女包括备孕妇女和孕期妇女。针对备孕妇女，ToRCH筛查可以提供孕前感染信息咨询，避免在感染期怀孕，减少出生缺陷的发生，做到一级预防；针对孕期妇女，ToRCH筛查提示孕妇免疫状况，结合产前诊断，可最大限度识别胎儿的严重缺陷，早发现，早干预，做到二级预防。目前临床上广泛达成共识的是育龄期妇女的ToRCH筛查应同时检测IgG，IgM。IgM单项检测对于结果解读易发生误判，IgM阳性不能充分证明近期感染[5]，部分人感染后IgM会持续2-3年表现低值阳性，这时出现的阳性虽然是真阳性但并不是急性感染，另外IgM阳性还有可能是类风湿因子、交叉反应带来的假阳性。这些临床困扰可以通过同时检测IgG，根据对IgG浓度的动态观察来判断IgM阳性是否真正有警示价值。

随着国家二胎政策的开放，临床上ToRCH筛查需求出现不少增长，每个筛查对象需要一次检测8-10项指标，因此选择高效、准确、成本较低的筛查手段显得尤为重要。透景公司推出的基于流式荧光方法学的ToRCH检测试剂盒，实现了5项联检，分别对Tox、RV、CMV、HSVI、HSVII五项IgG，IgM指标进行联合检测，且经性能验证，检测指标均不会互相干扰。

例如医院每天检测90例标本，每例标本检测ToRCH10项，就是900个测试，选择全自动化学发光法来计算时间，按国内化学发光检测仪器的平均检测速度180测试/小时来测算（由于标本检测需要稀释，实际检测速度约为90测试/小时），那么完成900项测试需要10小时。如若使用透景TESMI平台，检测只需3小时就能得到全部实验结果，这将大大提高检测效率和缩减检测时间，减少检测所需的耗材，符合目前国家降本增效的大要求，因此该产品一经问世，就引起了各界的广泛关注。

流式荧光技术在新生儿ToRCH筛查中的应用

新生儿开展ToRCH检测的意义

ToRCH感染是严重危害新生儿健康的重要因素之一。可导致多器官损害及一系列严重后遗症。对新生儿也应常规开展ToRCH检测，了解新生儿ToRCH感染情况，以便早干预、早治疗。由于IgG可由母亲胎盘传给新生儿，故针对新生儿的ToRCH筛查一般检测ToRCH IgM项目，必要时，可同时检测母亲的ToRCH感染情况来验证新生儿的检测结果。

新生儿感染ToRCH的临床表现

巨细胞病毒（CMV）感染症状

CMV的感染主要累及在消化系统[6]，是引起新生儿肝炎综合症的主要原因之一，可能与ToRCH病原体较易侵犯肝脏，引起肝细胞损伤有关，在新生儿肝炎综合征中该病毒IgM阳性率高达61.9%；CMV的感染还表现在胎儿的生长受到限制，因此该病毒的感染临床症状最严重。

孕妇中有90%以上带有CMV IgG抗体，其中孕妇妊娠期原发感染（感染率在0.17%－4%）对于胎儿的影响较大，其胎、新生儿感染率约为30%－40%，大多数先天性CMV 感染的婴儿在出生时不会出现症状或体征，但这些婴儿中5%～15%会出现后遗症，如感音神经性听觉丧失、精神运动发育迟缓和视觉障碍等。先天性感染CMV的新生儿中约有5%表现为典型全身巨细胞包涵体病（CID），即多系统、多脏器受累。另有5%表现为非典型的临床表现，其余90%均呈亚临床型。新生儿CID的特征是单核-巨噬细胞系统和中枢神经系统受侵犯，如紫瘢，肝脾肿大，黄疸，小头畸形，体重过轻，早产(孕期少于38周) ，腹股沟疝，脉络视网膜炎等。围生期感染的新生儿中，其出生时多无感染症状，2～4个月后发病，多为亚临床型，如刺激样咳嗽（呈百日咳样）、气促、发绀、间质性肺炎表现，黄疸、肝脾肿大、血小板减少性紫癜等。

风疹病毒（RV）感染症状

对于RV的感染，主要引起的是呼吸系统疾病，特别是早产儿，先天免疫力低下加之其肺部发育不全，免疫力下降极易发生肺部感染。新生儿感染RV，开始时有轻度上呼吸道感染的症状如咳嗽、喷嚏、流涕、嘶哑、头痛、食欲不振及发热等，体温通常在38℃-39℃之间，持续1-2天。发病半天至1天后出现皮疹，由面部延至躯干和四肢。皮疹为浅红色斑丘疹，分布均匀，大多于4-5天隐退。先天性感染新生儿中大约29%表现为“先天性风疹综合征”（congenital rubella syndrome, CRS），即出生时体重低于2.5公斤，发育迟缓，出生后全身性器官受损，如先天性心脏病，畸形，耳聋、失明。

弓形虫（Tox）感染症状

Tox的感染可导致胎儿血小板降低，受染胎儿或婴儿多数表现为隐性感染，有的出生后数月甚至数年才出现症状。先天性弓形虫感染的典型症状表现为脑积水、大脑钙化灶、视网膜脉络膜炎和精神、运动障碍等，此外还可伴有全身性表现，如发热、皮疹、呕吐、腹泻、黄疸、肝脾肿大、贫血、心肌炎、癫痫等。

单纯疱疹病毒（HSVI/HSVII）感染症状

HSV的感染一般为混合感染，疾病呈现多样性，病变常累及全身多个器官，具有能长期潜伏、反复发作及嗜神经组织的特点，其感染多见于早产儿，也可以发生在足月儿中，多数新生儿为产时或产后不久被感染，一般为HSVII型，偶由I型所致。出生时无异常，多在出生后5～10天发病，临床可表现为全身播散及局部病变两类。全身播散型预后差，病死率高，存活者会留有神经系统等后遗症；局部病变局限于皮肤、眼及口黏膜，出现脑炎或者肺炎症状。半岁以后的婴儿，因为来自母体的抗体消失，此时容易发生HSVI的原发感染，最常引起龈口炎，在牙龈、咽颊部黏膜产生成群疱疹，疱疹破裂后形成溃疡，病灶内含有大量病毒。

综上所述，新生儿感染ToRCH常发生严重的后遗症，最常见的表现是听力异常，高胆红素血症，肝功能异常，呼吸道感染，神经系统损伤，心肌损伤，血小板减少，先天性心脏病等症状，因此绝对不能忽视了婴幼儿的ToRCH筛查。同一患儿可出现多种病原体的感染，因此推荐开展全面的ToRCH检测，避免单一检测引起误诊。

新生儿血液样本相对难得，且检测项目较多，在进行新生儿ToRCH筛查时，临床上都希望检测试剂既能保证结果准确，且样本需求量少。透景公司推出的基于流式荧光技术平台的ToRCH检测试剂盒，只需10μL血清就可检测5项指标，效率提高5倍，避免新生儿多次抽血的痛苦。

流式荧光技术

流式荧光技术，是基于编码微球和流式技术的一种临床应用型高通量发光检测技术，又称悬浮阵列、液态芯片、液芯以及xMAP技术等。该技术整合了荧光编码微球、激光检测、应用流体学、高速数字信号处理技术等多项技术，具有多指标联合检测、通量高、速度快、标本用量少、既能检测蛋白也能检测核酸、既适用于临床检验也适用于科研等多种优点，代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。

流式荧光技术是首个通过美国FDA认证的临床应用型高通量诊断技术。

2005年，获得了全球科技产业和行业研究的权威机构—Frost & Sullivan—授予的“2005年度国际临床诊断技术革新大奖”。

与化学发光法相同，流式荧光法也是一种液相的反应体系，在流动的液相中，抗原抗体反应更充分，更有效率，在技术源头上保证了试剂的高性能。

透景的流式荧光检测平台

透景生命流式荧光技术除了应用于妇女及新生儿ToRCH筛查上，在该技术平台上早先开发的肿瘤标志物的联合检测和人乳头瘤病毒HPV全分型（27型）检测试剂盒已经凭借独特的技术优势和临床使用准确性及安全性特点在很多三甲医院开展，受到临床检验实验室的认可和支持。

参考文献

[1] 代礼，朱军，周光萱，等。1996~2000年全国神经管缺陷的动态检

测。中华预防医学杂志。2002，36（6）：58.

[2] 王燕，张佩红，陈啸洪，等。绍兴地区1998-2007年新生儿出生缺

陷分析。安徽医学，2010，31（9）：1126-1127.

[3] 俞发明，马戈，刘鹏程，等。1999年至2009年国内期刊有关出生缺

陷计量文献分析。安徽医学，2010，31（5）：519-520.

[4] Lu B，Yang Y. Detection of TORCH pathogens in children with 

congenital cataracts.[J]. Experimental & Therapeutic Medicine，2016，12(2):1159.

[5] Liesenfeld O，Press C，Montoya J G，et al. False-positive 

results in immunoglobulin M (IgM) toxoplasma antibody tests and importance of confirmatory testing: the Platelia Toxo IgM test. [J]. Journal of Clinical Microbiology，1997，35(1):174-8.

[6] Hendriks G，Mcpartland J，Elmatary W. Unusual association of 

diseases/symptoms: Gastrointestinal presentation and outcome of perinatal cytomegalovirus infection[J]. Bmj Case Reports，2013，2013（jan04 1）.

 上海透景生命科技股份有限公司 供稿