编读往来

长治市人民医院检验科 —— 联系人：李老师

请教，怎样提高脓液细菌培养的阳性率？

本刊顾问周惠平教授：关于提高脓性标本培养阳性率，首先是保证取材的质量。上个世纪九十年代震惊全国的济南女孩杨某某手臂感染事件，就是因为数次取材都是创伤表面分泌物，培养出的细菌为杂菌而非真正引起感染的病原菌，因而使得导致错误用药，延误病情，扩大感染，对患者造成相当大的损失和痛苦。因此要很好清理创伤表面，无菌操作，对于较深部位的标本，必要时可以切开创面。标本留取后要立即送检。接收标本后，做培养的同时做涂片镜检，引起感染的细菌多为一种，但对免疫力低下患者或感染时间较长患者可出现两种细菌的混合感染。做镜检一方面了解取材的质量，同时大致也了解了引起感染的细菌种类，以及时与临床沟通。此外应该选择合适的培养基，必要时同时进行需氧和厌氧培养。

新民市人民医院检验科 —— 匿名读者

1）怎样区分尿标本的致病菌和定植菌？

2）我想请问一下，我们医院送检的肺泡灌洗液或者支纤镜下吸出物80%左右培养出来都是草链跟少许卡他（奈瑟）。这样是取材的问题还是我们培养的问题？

本刊顾问周惠平教授：

1）关于尿液标本问题，一是严格的留取中段尿，这是非常重要的，女性患者一定要在清洗外阴后留取中段尿。要求留取标本后立即送检。二是做尿液细菌计数，三是做尿液镜检。引起泌尿系感染最常见为一种微生物，免疫力低下的患者可以由两种细菌甚至两种以上细菌引起感染。

2）关于支纤吸取物，肺泡灌洗液培养确实存在问题，如果80％是草链和卡他布兰汉氏菌我认为很可能是污染，是取样问题，因为这两种菌是口腔的常居菌，在操作时很容易造成污染，当然这还要结合当时的具体操作情况，以及患者的具体情况进行分析。草链及卡他布兰汉氏菌引起感染特别是对免疫力低下患者也是可能的。

此外还应考虑到取样器械的消毒与污染问题。

上述供参考。

匿名读者

POCT有的厂家过于强调快速检测，2-3分钟出结果，对于POCT需要层析爬膜反应的，这么短的时间能反应完全吗？这样的结果有稳定性保证吗？

解放军总医院临床检验科张倩博士：

反应时间与具体反应有很大关系，2-3分钟出结果并不是针对所有实验，部分技术成熟性能稳定反应快速的POCT实验可能可以达到，其结果稳定性与技术工艺有关，应具体问题具体分析，不能一概而论。

层析反应一般而言2-3分钟层流不彻底，反应不完全，无法做到定量。层析定量从上样到发出结果需要20-30min，但是成本较高，目前临床应用的一般POCT基本处于定性、半定量阶段，较少做到定量。

对于医院引入新POCT仪器，应先做性能验证，通过之后再引入，既不能盲目相信厂家性能验证结果，也不应太过怀疑，止步不前。

匿名读者

实验室要做EGFR ctDNA检测的性能确认，采用高通量测序法，每种变异位点都要做确认吗，还是只做常见的变异位点的性能确认？

解放军总医院临床检验科张倩博士：

WHO将性能验证定义为，证明所使用的一个程序、过程、系统设备或方法能按预期进行工作以及取得预期结果的活动（或过程）。肿瘤NGS性能评价需包括以下性能指标：精密度（重复性研究）、准确度（方法学比较研究）、分析灵敏度（测定下限研究）、分析特异性（干扰物质研究）、可报告范围（可测定的基因区域研究）。

无法对NGS检测的所有基因和突变位点进行评价时，可从不同的突变类型（单核苷酸变异、缺失、拷贝数变异和结构变异）和临床意义明确的常见基因两方面进行。也就是说，一方面证明NGS对各种不同突变类型的检测能力，另一方面证明对重要常见基因的检测能力。如果临床实验室可接受多个样本类型，那么对每种样本类型均需分别进行评价。NGS检测项目、检测基因以及检测突变类型等均有不同，难以统一规定实验室性能评价的最低样本数。实验室可根据检测的基因数量、检测过程的复杂程度和所使用的检测试剂平台的成熟程度自行决定。

关于临床分子检测的性能验证与性能确认，卫生部临检中心李金明教授进行过详细讲解，其他相关内容请自行学习《临床分子检测：性能验证与性能确认》。

参考：李金明，《临床分子检测：性能验证与性能确认》。