警惕新冠的同时，小心换季时期流感来袭，快速精准诊断要靠它
一、新冠未去流感又来，呼吸道病原体快速精准检测意义重大
「史上最热」的炎夏正逐步褪去，在我国北方一些地区，凉爽的秋季已经来临。随着金秋一起复苏的，还有呼吸道感染性疾病。经过一场史无前例的COVID-19疫情，人们意识到了看似不起眼的呼吸道病毒的巨大威力。呼吸道病毒是指一类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为入侵门户，主要引起呼吸道组织器官病变的病毒，如呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（FluA)、乙型流感病毒（FluB）、腺病毒3、7（ADV3、7）、人类偏肺病毒（Hmpv）、人类博卡病毒（Hbov）等，当然也少不了大名鼎鼎的冠状病毒。呼吸道病毒感染是全球范围内人类发病和死亡的主要原因之一[1]。其中甲、乙型流感病毒每年都会在全球范围内引起一定程度的暴发流行，直接威胁人类生命健康。而呼吸道合胞病毒也是引起冬春季婴幼儿下呼吸道感染最常见、最重要的病原体之一，研究发现免疫功能缺陷的成年人及老年人是RSV的易感人群[2]。目前新冠病毒感染仍时有发生，而秋冬季的其他呼吸道病毒也逐渐活跃。由于不同病毒感染的症状相似，也有可能出现混合感染等情况，只有进行快速、准确的病原体诊断，临床才能对患者进行针对性的治疗。同时，呼吸道病毒检测对防止医院感染及抗菌药物的滥用以及疾病的长期病原监测、预防、流行病学研究及疫苗研制均有重要的意义[1]。
二、尺有所短寸有所长——常见呼吸道病毒检测方法大比拼
目前常见的临床呼吸道病毒检测方法主要包括病毒分离培养、病毒核酸分子检测、直接荧光免疫镜检法和免疫学检测等。各种方法各有其优缺点和适用场景，用一句话来概括，可谓「尺有所短，寸有所长」。
病毒分离培养 | 培养法尽管敏感性高，是病毒诊断的金标准，但有一定的局限性，比如，操作要求高且繁琐，病毒分离培养周期较长，实验必须在生物安全二级（BSL-2）以上实验室的生物安全柜内进行，存在一定的安全隐患，不利于在流行期间作出快速诊断[3]； |
病毒核酸分子检测 | 基于核酸扩增技术的分子检测法，尽管灵敏度高、特异性强、可在较短时间内对病毒进行检测，但由于需要昂贵的设备和专业的技术人员，且对变异的病原体容易产生假阴性，而对某些无症状的人群又能检测出病原体的存在[4]，在使用上也具有一定的局限性； |
直接荧光免疫镜检法 | 操作相对繁琐，且需要专业人员操作，仅适合在实验室环境进行； |
免 疫 学 检 测 | 包括呼吸道病毒的抗原、抗体检测，其中抗体检测并不直接检测病毒，而是检测患者感染病毒后产生的抗体，因此时间上具有一定滞后性，且单次检测难以判断是否现症感染。抗原检测的主要方法有胶体金法和荧光免疫层析法，检测结果的特异性较高，检测出的阳性结果可用于病原体存在的确认，且由于操作简便，深受临床医生的喜爱，也是目前临床科室对病毒类微生物进行检测的主要手段。但胶体金法，灵敏度低，抗体未达到检测限易致假阴性，尤以儿童及老年人明显[5]。 |
总结起来说，通过免疫学方法检测患者样本中的呼吸道病毒抗原，是上述方法中最简便快捷的，对于需要早期发现、及早治疗的呼吸道感染性疾病诊断十分重要，尤其是对于发热门诊这类场景来说。其中荧光免疫层析法有望发挥更大的作用。
三、道高一尺魔高一丈，基于荧光免疫层析法的呼吸道病原体检测整体解决方案
免疫荧光法主要是在荧光物质的帮助下对抗体进行标记，从而达到对抗原进行定位的目的，同时其进行标记的荧光色素对抗原抗体的活性没有任何影响，其在抗体上通过与对应的抗原进行结合后会显现出一种特异性的荧光反应[3]。而荧光免疫层析法是结合了抗原抗体特异性免疫反应和色谱层析技术的一种膜分析方法，通常以荧光物质，如荧光素、量子点等作为荧光标记物，标记抗原或抗体，再与加入的待测样本中的分析物进行免疫反应形成复合物，通过层析，复合物与包被膜上的捕获抗体结合，通过紫外光源激发复合物中的荧光物质，由仪器的检测器读取可见光，测定最终产物的荧光强度从而得出待测物浓度[6]。荧光免疫层析法由于使用了荧光技术，敏感性大为提高，还可对患者做到早发现、早诊断、早隔离、早治疗，减少疾病的暴发流行，有利于流行病学的预防和调查，且结果判断由仪器进行，具有客观性，摆脱了肉眼判断结果造成的人为误差，使得医生对获得的结果更有信心。
基于荧光免疫层析技术的干式荧光免疫分析仪，配套各类病原体检测试剂盒，全方位搭建的呼吸道病原体快速检测整体解决方案，不仅快速高效，结果准确，占地面积小，节约实验室空间，非常适合于流感爆发季，发热门诊等人员流动大，检测人员紧缺的应用场景；目前市面上的产品，检测样本为鼻咽拭子，样本采集方便；可批量化检测、操作简便、仪器自动判读和数据管理功能可以减少专业操作人员的工作量；干式荧光免疫分析仪的检测试剂卡模式也免除了类似湿生化的多瓶检测试剂配置，同时试剂盒可常温储存无需冷藏冰箱，方便存取，极大程度上的节约实验室成本[7]。综上，基于荧光免疫层析法的呼吸道病原体检测整体解决方案，可快速、准确的帮助临床监测与控制呼吸道病毒的流行，而且能为临床早期诊断提供可靠的实验室依据，也是合理选择治疗方案的基础。
图1.干式免疫分析仪（来源：客户提供）
END
参考文献
[1]金玉霞.呼吸道病毒检测方法的进展及意义[J].中华医院感染学杂志,2013,23(04):959-960.
[2]曾军荣.呼吸道合胞病毒的检测方法[J].检验医学与临床,2011,8(11):1348-1350,1385.
[3]胡瑞,张艳亮,张娟.甲、乙型流感病毒检测方法的研究进展[J].系统医学,2023,8(02):178-182+198.
[4]Buller RS.Molecular detection of respiratory viruses[J]. Clin Lab Med. 2013;33(3):439-460.
[5]古巧灵,唐萍,龚丹.呼吸道病原体检测的临床应用研究进展[J].健康必读,2018(36):304.
[6]《荧光免疫层析分析仪注册审查指导原则》国家药监局关于发布荧光免疫层析分析仪等14项注册审查指导原则的通告（2021年第104号）(nmpa.gov.cn)
[7]干式荧光免疫分析仪Sofia2说明书
