837例泌尿生殖道标本衣原体支原体感染及药敏分析_检验世界网

检验视界网 2010-10-09

  潘少池,林光利,练芳梅

  (广东优生优育协会附属康优医院,广州番禺 511450)

  【摘要】

  目的  了解广州市番禺地区泌尿生殖道标本中沙眼衣原体(CT)、支原体感染状况、致病机制及药物敏感性分析,指导临床合理用药。

  方法  采用CT抗原检测板,支原体(Uu/Mh)培养、鉴定、计数及药敏一体化测试盒对837例我院门诊体检初步筛查为泌尿生殖系统感染患者进行衣原体支原体检测和药物敏感性试验(AST)。

  结果  通过初步培养鉴定分型,837例泌尿生殖系统感染患者标本中,其中CT检测669例,阳性55例,阳性率8.2%;支原体培养710例,阳性363例,阳性率51.1%,其中解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)、Uu+Mh混合感染以及≤104ccu/ml阳性率分别为31.1%(221/710)、4.1%(29/710)、12.8%(91/710)、3.1%(22/710)。Uu对12种抗菌药物敏感性较高的是交沙霉素(98.6%)、强力霉素(97.0%)和克拉霉素(96.8%)。Mh对12种抗菌药物敏感性较高的是强力霉素(96.6%)和交沙霉素(93.2%),Uu+Mh混合感染则显示对大部分大环内酯类抗生素高度耐药。

  结论  本地区泌尿生殖道感染中CT、支原体感染明显出现早龄化、年轻化趋势,值得关注。我们应该在门诊体检中重视CT的筛查工作,及早干预;本地区支原体感染以Uu为主,其次为Uu+Mh混合感染和Mh感染,以性行为传播途径较为常见。随着当今抗菌药物的大量使用,部分患者出现了对12种抗生素全耐药的情形,细菌耐药性日益成为医学界共同关注的话题。

  【关键词】  广州番禺;泌尿生殖道;支原体;衣原体;感染;药敏

  沙眼衣原体 (Chlamydiatrachomatis,CT)个体微小,它是一类介于细菌与病毒之间,专性细胞内寄生的病原体,存在于泌尿生殖道的上皮细胞中[1]。研究表明, CT是引起人类泌尿生殖感染的常见原因之一。支原体 (Mycoplasma)属于无细胞壁的最小的原核细胞型微生物,其形态呈多形性,分类上可分为三个科:①支原体科 (Mycoplasmas-taceae);②无胆甾原体科 (Acholeplasmataceae);③螺形支原体科 (Spiroplasmataceae)。其中支原体科分为支原体和脲原体两个属。目前普遍认为,支原体为女性生殖道正常菌群的组成部分之一,属于条件致病菌[2],通常只有在机体免疫力低下或者局部微环境改变的条件下才会引起疾病。

  1  材料与方法

  1.1  主要试剂及设备   沙眼衣原体抗原检测试剂盒(乳胶法,由杭州艾康生物技术有限公司生产);支原体分离鉴定药敏一体化试剂盒(添加适合支原体生长的营养物质和抑制杂菌生长的混合抗生素,由珠海市银科医学工程有限公司生产);计时器;37℃恒温培养箱。

  1.2  标本收集和处理   女性排除经期经血、阴道黏液和脓血污染,利用配套无菌拭子刮取子宫颈管鳞柱状上皮分泌物置于运送培养基中送检;男性采样前1小时无排尿,均使用男用拭子取尿道分泌物置于运送培养基中送检。所有标本均在取样后15分钟内接种,检测人员均经过系统培训,严格按照试剂盒说明书和实验室生物安全规范操作。

  1.3  培养与鉴定

  1.3.1  CT抗原检测  加入适量样本液A到处理管并插入取样拭子不断挤压、旋转,处理2分钟后加入等量样本液B继续处理,挤干拭子水份并弃去,将处理液加到包被有多克隆抗体的测试板中,10分钟内判断结果。CT阳性时,测试窗口均出现质控线(C)、检测线(T);仅出现C线,判为阴性;C线不出现或C、T线均不出现则为实验无效。

  1.3.2  支原体培养及药敏  Uu和Mh在生长过程中分别水解尿素和精氨酸产生碱,导致肉汤培养基PH升高,并使预先加入的指示剂变为桃红色,颜色深浅与取样量、培养时间、支原体的数量有关。处理时,先将取样拭子放入肉汤培养基中搅动1-2分钟后挤干弃去,再将100ul含标本的肉汤培养基转移入测试板的阴阳对照孔、Uu/Mh鉴定孔和12个抗生素药敏孔内,并滴加2滴无菌石蜡油封板,最后将其置于37℃恒温培养箱培养24-32小时后判读结果。纯培养两天后培养基颜色呈橘黄色为阴性,培养基透明且呈玫瑰红色为阳性,提示支原体浓度≥10^4ccu/ml;药敏孔不变色为敏感,低浓度孔变色而高浓度孔不变色为中介,高低浓度孔均变色为耐药,高浓度孔变色而低浓度孔不变色或培养基出现浑浊则高度怀疑杂菌污染,结果不可信。

  1.4  统计学处理  剔除不合格和怀疑污染的病例,综合统计我院2008年12月至2009年11月一年来837例泌尿生殖系统感染患者标本培养结果,根据CT和支原体感染和药敏情况,应用Exc

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