浅谈流式荧光技术在ToRCH筛查中的应用

ToRCH是一组病原微生物的英文首字母的缩写。ToRCH筛查是指对弓形虫，风疹病毒，巨细胞病毒，单纯疱疹病毒1型和2型这5种病原体感染的检测，因其对于优生优育和习惯性流产的病因分析有参考价值，有助于减少不良妊娠结局和降低出生缺陷，现在被临床广泛认可和使用。适用人群为备孕妇女，高危孕妇，新生儿等。

实验室ToRCH检测包括免疫血清学检测和核酸检测。其中ToRCH病原体的特异性IgM、IgG检测因其相对于核酸检测的操作便利性和标本可得性成为临床上应用最为广泛的早期初筛方法。

实验室传统的ToRCH特异性IgM、IgG的检测方法有酶联免疫法（ELISA），胶体金法，化学发光法。这三种方法各有优点，适合不同的实验室需求。ELISA法价格实惠、一般实验室都熟悉操作技术；胶体金法操作方便，无需特殊设备；化学发光法为全自动化操作，结果客观，重复性好。

在实际应用中，如果遇到待测样本量大，或者新生儿样本量少等情况。使用传统的检测方法，检测人员往往还是觉得有很多不如意之处。

假设：每天要对90例样本进行ToRCH全套筛查（10项），选择最省人力的方法—化学发光法来检测，按国内化学发光检测仪器的平均检测速度180测试/小时来测算（由于标本检测需要稀释，实际检测速度约为90测试/小时），那么完成900个测试就需要10小时。当然这可以通过增加仪器或者手工稀释来节约时间，但毕竟还是有些不便之处。

随着检测技术的不断推陈出新，2015年透景科技基于流式荧光技术平台开发了ToRCH特异性抗体检测试剂盒。该技术平台最大特色在于只需要少量样本（10ul左右）就能同时完成多个指标的联合检测，透景的ToRCH 10项（弓形虫，风疹病毒，巨细胞病毒，单纯疱疹病毒1型和2型的IgM和IgG各5项）试剂盒不同于传统方法学的特点是：只需2次检测就能得到10项检测结果，经性能验证，检测不存在互相干扰（见表１，表２）。如果搭配全自动高通量免疫检测系统（TESMI），还以上述假设为例，检测900个测试，只需3小时就能得到全部实验结果，这将大大提高检测效率和缩减检测时间。因为只需两个试剂盒就能检测全套ToRCH 10项，既节省样本使用量和试剂位，又减少耗材、运输和存储的空间和费用，所以一经问世，就引起了各界的关注。

TESMI（透景全自动高通量免疫检测系统）

流式荧光技术也称xMAP技术，又称液态芯片、悬浮阵列等，是继基因芯片、蛋白芯片等固态芯片之后的新一代高通量分子诊断技术平台，最突出优势在于仅需极少量样本和较短的时间即可同时对样本中的多种不同目的分子进行定性和定量分析。该技术是通过美国FDA认证的临床应用型高通量诊断技术。2005年，该项技术获得了全球科技产业和行业研究的权威机构——Frost & Sullivan——授予的“国际临床诊断技术革新大奖”。流式荧光技术既能检测蛋白也能检测核酸，其能实现高效的多项联合检测的原理是利用不同荧光编码的微球（最多可有100种不同荧光编码）检测不同的目标。每种编码微球共价交联上针对特定检测物的抗原、抗体或核酸探针等捕获分子。应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的捕获分子发生特异性结合，在一个反应孔或管内可以同时完成多种不同的检测反应。同时以安全的生物荧光物质-藻红蛋白作为示踪剂，最后微球在鞘流液的推动下高速地经过激光检测器，电脑记录下不同微球的荧光信号并转换成定量检测结果。

与化学发光法相同，流式荧光法也是一种液相的反应体系，在流动的液相中，反应更充分，更有效率，从而在技术源头上保证了试剂的高性能。

1.红色激光读取微球颜色

2.绿色激光读取报告分子荧光强度 

3.电脑分析处理将荧光信号转化为定量检测结果 

流式荧光技术在ToRCH筛查上的应用现还处于起步阶段，但透景科技在该技术平台上早先开发的肿瘤标志物的联合检测和人乳头瘤病毒HPV全分型（27型）检测试剂盒已经凭借独特的技术优势和临床使用准确性及安全性特点在很多三甲医院开展，受到临床检验实验室的认可和支持。本文因限于篇幅，无法详细介绍产品性能验证实验数据，如果您对流式荧光技术平台或产品感兴趣，欢迎垂询或浏览网址：http://www.tellgen.com。

流式荧光技术平台既拥有与化学发光法比肩的高精密度、高灵敏度和特异性，又具备多指标联检，灵活组合，可分可合的优势。上海透景将来还会提供更多符合实验室需求的的高性能的多指标联检试剂（如自身免疫抗体的联合检测，心脏疾病标志物的联合检测，呼吸道病原体联合检测等）来为检验实验室带来更多的便利和高效率，和各位检验同道一起推动中国检验医学的发展。

  上海透景生命科技股份有限公司  供稿