尿液有形质控物对白细胞形态学检测方法改进的研究
【摘要】目的：改进尿有形质控物白细胞形态学的方法研究。方法：用调节试剂渗透压的方法，在白细胞进行固定的同时，保持细胞一定的吸胀状态，从而将白细胞的形态固定在圆整而且规则的状态，在尿液有形成分分析仪上识别为白细胞。结果：本实验研究方法将动物血的白细胞分离提取后进行固定，保持白细胞的原始形态。结论：通过试剂不同的渗透压来固定白细胞，达到白细胞的形态清晰圆整，形态规则，大小均一，临床识别率高。
【关键词】白细胞；形态学；质控物
白细胞的形态学观察是利用人工镜检的方式观察血细胞载玻片，但是人工对白细胞进行分类是枯燥和低效的，通过图像处理和模式识别等技术实现白细胞检测的自动化和智能化是当前的发展趋势[1]。白细胞形态学的识别意义重大，慢性苯中毒[2]、新生儿败血症[3]、SARS患者[4]、白细胞空泡证[5]等研究都通过对白细 胞形态学的观察发现出异常，进而进行诊断。
尿液有形成分分析仪用质控物是一种用于监控尿液有形成分分析仪测试的室内质量控制物质[6]，一般包含红细胞、白细胞、结晶、上皮细胞等有形成分。由于现有的仪器原理大部分都是数字成像原理[7]，所以对质控物这些成分的形态学成像要求较高，要求与临床样本的各细胞形态尽量接近，才能达到尿液有形成分分析仪质量控制的目的。本文从白细胞固定剂渗透压的调节技术讨论形态学的改进。
一、材料和仪器设备
1. 哺乳动物的1L新鲜血液，在市场加入抗凝剂采集得到。
2. 用甲醛（国药集团）配制细胞固定剂，配制PBS缓冲液，细胞保存液（自配），生理盐水（自配），溶血剂（自配）。
3. 大容量离心机（贝克曼J6），尿液有形成分分析仪URIT-1280，全自动冰点渗透压仪。
二、研究方法
1. 用离心的方法将新鲜血液离心分离得到白细胞和红细胞混合液，加入一定量的溶血剂将红细胞溶血，再离心得到纯白细胞液。
2. 调节细胞固定剂母液的渗透压为100±10（mOsm/L）、250±15（mOsm/L）和400±20（mOsm/L），加入一定量的甲醛分别配制为细胞固定液a、b、c。
3. 将得到的纯白细胞液分成三份，分别用细胞固定液a、b、c固定白细胞，得到白细胞A、B、C。
4. 分别将白细胞A、B、C进行稀释，在尿液有形成分分析仪URIT-1280测试，对比白细胞形态。
三、研究结果
1. 白细胞A的测试图片如图1，细胞圆整规则，大小均一。
图1. 白细胞A的测试图
2. 白细胞B的测试图片如图2，部分扭曲，不太圆整不太规则。
图2. 白细胞B的测试图片
3. 白细胞C的测试图片如图3，大多扭曲，不圆整不规则。
图3. 白细胞C的测试图片
四、分析与讨论
优利特尿液有形成分分析仪的原理是数字成像，所以质控物细胞的成像图形对于仪器的质量监控至关重要。哺乳动物的白细胞原始形态是非常规则和圆整的，但是要经过一系列的溶血和固定处理才能得到稳定性较好的质控物原料细胞，在这过程中，白细胞的形态会发生变化，需要从试剂的渗透压、溶血剂配方、固定剂浓度等各方面去试验，才能得到一个比较理想的细胞图形，本文是仅从试剂渗透压的条件去试验研究得到的结果。
参考文献
马岩, 血细胞形态学检验与识别技术研究. 北方工业大学, 2019
杨荫森, 冯克玉, 刘福环, 郭琦. 慢性苯中毒白细胞形态学改变[J]. 中华劳动卫生职业病杂志, 1989-08-29.
陈鸣科, 新生儿败血症时中性白细胞的形态学和数量[J]. 国外医学(儿科学分册), 1988-03-01.
吴燕, 张远春, 来亚杰, 王银平, 王质彬. SARS 患者白细胞形态学观察[J]. 中日友好医院学报, 2003-12-15.
周永新，张志惠 白细胞空泡症细胞形态学和细胞化学染色观察[J].上海医学检验杂志 1994-03-30
YY/T 1530-2017, 尿液有形成分分析仪用控制物质
YY/T 0996-2015, 尿液有形成分分析仪（数字成像自动识别）.
