全国临床免疫检验质量保证大会报道
2018年5月22日至24日，由卫健委临检中心主办的全国临床免疫质量保证大会在江苏省南京市召开。大会开幕式由卫健委临检中心副主任李金明教授主持，李金明教授首先介绍了出席大会的领导和专家，并对各方面对本次大会的支持表示感谢。接着，江苏省临检中心主任许斌教授致欢迎辞。来自全国各地的专家学者和一线检验医师齐聚南京，济济一堂。
厦门大学公共卫生学院的夏宁邵教授首先为与会者带来了《病毒性肝炎免疫诊断新指标及其转化医学研究》的报告。夏宁邵教授首先介绍了甲、乙、丙、戊四型肝炎病毒感染导致的肝病造成沉重的全球医疗卫生负担。从1990年到2013年，病毒性肝炎导致的死亡不减反增，从死亡原因的第10位上升到第7位。而导致死亡的主要原因是慢性HBV/HCV和急性HBV/HEV感染。接着夏教授介绍了各型病毒性肝炎的特征和病毒性肝炎免疫诊断指标。近年来新发展的具有临床意义病毒性肝炎免疫诊断指标主要有两类，一是从量化的角度发现经典指标的新临床意义，如qHBsAg水平、qAnti-HBc水平等；二是填补原有空白的免疫诊断指标，如HEV抗原。而现有药物实现CHB临床治愈的效果可以说非常有限，在这种情况下，临床上迫切需要优化CHB的治疗策略，从而对精准诊断提出了更高的要求。夏教授主张从量化角度再认识经典乙肝血清学指标——HBsAg定量。临床中发现治疗中HBsAg下降速度/程度越显著，应答越好，如PEG-IFN治疗第12周HBsAg水平无下降或HBsAg＞20,000IU/mL时考虑停止治疗。而治疗后HBsAg水平越低，病人临床复发风险越低，如NA治疗后HBsAg水平＜100IU/mL停药后复发概率较低。接着夏教授介绍了Anti-HBc定量方法学，提出从量化角度再认识Anti-HBc的临床新意义。竞争抑制法、间接法、夹心法是Anti-HBc免疫检测的三种原理。Anti-HBc免疫检测的方法学也经历了进化。竞争法的灵敏度较低、重复性不佳，因而不适合定量检测，而间接法的灵敏度提高、重复性提高，可用于定量检测，而夹心法的灵敏度/特异性更佳，适合定量检测。高度稳定的重组核心抗原，标记后仍然维持良好的颗粒抗原性，是实现双抗原夹心法检测HBcAb的基础。基于Caris200平台的qAnti-HBc化学发光定量检测方法，定量范围100-100,000IU/mL，覆盖临床大部分慢乙肝感染者Anti-HBc水平分布，适合临床应用。夏教授介绍了慢性HBV感染自然病程中的qAnti-HBc水平，HBsAg（+）的平均qAnti-HBc水平＞1000倍HBsAg（-），OBI感染者的平均qAnti-HBc水平4倍于既往感染者，慢性乙肝患者平均qAnti-HBc水平12倍于ALT正常的感染者。qAnti-HBc水平在患者ALT≤5×ULN时与ALT水平呈线性正相关，此种关联独立于HBV DNA水平、HBsAg水平、HBeAg状态和病毒基因型。夏教授介绍了复旦大学华山医院张继明教授关于CHB患者qAnti-HBc水平与肝组织病理状态的相关性研究，指出qAnti-HBc与肝脏炎症/纤维化严重度呈正相关。在ALT正常的病人中，高水平qAnti-HBc提示肝组织中度以上炎症的可能性较高。通过对qAnti-HBc预测治疗应答的研究，得出结论，治疗后随访终点取得SR病人基线qAnti-HBc显著更高，治疗后随访终点取得SR的病人基线qAnti-HBc显著更高。结合基线qAnti-HBc预测ADV、PEG-IFN治疗后HBeAg血清转换率，探讨了qAnti-HBc指导药物选择的可行性。报告最后还介绍了戊肝病毒诊断试剂研究的新进展。
中国医学科学院皮肤病研究所性病参比实验室的尹跃平研究员作了《梅毒血清学检测技术及策略新进展》的报告。尹跃平研究员首先介绍了2000至2017年我国梅毒报告发病率的趋势和有关梅毒防治政策和指南以及有关梅毒实验室检测的相关指南。梅毒实验室检测的目的是发现梅毒、判断治疗效果、控制母婴传播（包括梅毒暴露婴儿的评估和先天梅毒的诊断）。常用的梅毒实验室检测方法是有病原学检测、梅毒血清学检测、组织病理学检测、白细胞检测和蛋白检测。病原学检查是诊断早期梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。梅毒血清学检测方法包括梅毒非特异性抗体检测（非梅毒螺旋体抗原血清学试验）、梅毒特异性抗体检测（梅毒螺旋体抗原血清学试验）。我国对于梅毒非特异性抗体检测颁布了《中华人民共和国卫生行业标准WS/T491—2016：梅毒非特异性抗体检测操作指南》。而梅毒特异性抗体检测包括梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光免疫分析法（CLIA）、梅毒免疫层析-梅毒快速检测（RT）、荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA—ABS）、梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）。TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应，具有较高的敏感性和特异性。TPPA是目前公认的梅毒抗原血清学试验金标准，常用于新方法、新试剂的参照标准。ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条，加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物与酶标记物结合，用酶联检测仪判定试验阳性反应，本法可用于大样本血清检测。梅毒非特异性抗体检测的临床意义包括：试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好，可作为梅毒筛查试验；可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征；结合梅毒特异性抗体检测鉴别梅毒现症感染和既往感染。而梅毒特异性抗体检测的临床意义包括：作为梅毒非特异性抗体检测（如RPR等）初筛阳性标本的确证试验，排除RPR假阳性；可用于梅毒初筛，但不能区分既往感染和现症感染，应结合梅毒非特异性抗体检测结果进行诊断；此外不能作为疗效观察的指标。报告最后总结了梅毒血清学检测的注意事项，包括：非特异性和特异性两类抗体检测均可作为梅毒初筛试验；任何一类抗体初筛阳性均需要采用另一类方法复检验证才能作为梅毒诊断的依据。目前推荐采用逆向检测策略，可采用任何一种特异性抗体检测技术，但要了解敏感性和特异性存在差异；两类抗体检测均存在窗口期，但窗口期时间不一样；定量试验用于疗效观察；要区别蛋白印迹试验（WB）-IGg和IGM抗体检测在先天和后天梅毒中的应用意义。
北京协和医院风湿免疫科李永哲作了《自身免疫病实验诊断技术》报告。首先简要介绍了自身抗体临床应用的概况，指出自身免疫病（AID）自身抗体检测的临床价值主要在早期诊断、分层分型、疾病预警、病情评估、预后判断等五方面。国外临床常规自身抗体检测项目已达200种以上，而国内的情况却是临床常规项目少、普及性低、质量管理差。李教授指出，对于ANA检测的标准化，2015年ACR会议大部分专家仍然认同：1、ANA检测并无真正意义上的金标准；2、IIFA是ANA筛查的参考方法，其他方法虽也可采用，但会出现不同的假阴性和假阳性。因此，其他方法阴性但临床强烈怀疑时，必须做IIFa。关于ANA核型的国际共识，2015年在德国召开的第二届ANA核型国际共识研讨会上对28种HEp-2细胞核命名和归类，分为三大类，以AC编码命名为AC1-AC28。他们在推进自身抗体检测标准化方面，率先在国内提出抗核抗体谱的检测程序，明确了抗核抗体谱筛查与确证试验的关系；率先推出抗核抗体免疫荧光模型及其结果报告方式国际共识解读；率先提出抗磷脂抗体谱的规范检测。最后李教授还对自身抗体的检测作了现状和展望。
南方医院检验科裘宇容教授作《抗核抗体间接免疫荧光检测标准化多中心研究》。裘宇容教授首先介绍了ANA抗体的概念及检测方法。ANA是抗细胞内所有抗原成分的自身抗体总称，可见于各种免疫性疾病，特别是风湿免疫性疾病。是自身免疫性疾病诊断和鉴别诊断、病情活动性判断的重要依据。其检测方法包括：间接免疫荧光法、ELISA、荧光酶免法、化学发光法和流式荧光法等。2015年美国风湿学会（ACR）大部分专家的观点认为：ANA并无真正意义上的金标准；IIFA是ANA筛查的参考方法，其他方法阴性但临床高度怀疑时，必须做IIFA法。而IIFA手工操作模式容易受到试剂、操作、显微镜、判读经验、质量控制和滴度系统等多方面的影响。裘教授指出，为了保证自身抗体检测检验结果的一致性，需要加强操作人员技能培训，使用仪器自动处理载片，加强人员阅片能力的训练，实现自身抗体检测的自动化、标准化和智能化。最后，裘教授还介绍了一项由广东省八家实验室参与的抗核抗体IIFA法的多中心研究。在实验中，HELIOS全程无人值守，其结果溯源性好，可全程实时记录，结果图片永久保存，还可提高实验室间检测结果的一致性。裘教授总结到，通过这项多中心研究，可得出结论：目前自身抗体间接荧光检测，各实验室检测水平有差异，检测效果受主观因素影响大，较难实现结果互认；HELIOS系统可替代手工操作，可提高实验室间检测结果的一致性，判读标准更客观，有助于实验室间结果互认；自身抗体检测的自动化、标准化和智能化是未来发展趋势。
卫健委临床检验中心副主任李金明教授作《我国临床免疫检验质量保证的关键问题与对策》报告。李主任首先指出临床免疫检验的特点，即“四多一难”，即“方法多、项目多、手工操作多、检测影响因素多，一致化或标准化难”。质量保证的关键问题，需要确认如下事项：检验申请单合适（对who在when开出what申请单）、标本正确完好（采集、运送和保存）、实验室环境条件好（适宜的温湿度、避免干扰）、仪器设备状态好（日常维护、定期校准）、实验室人员能力合格（培训加能力评估）、得到结果的过程有监控（室内质量控制和室间质量评价），以及针对差错、投诉、失控等分析原因采取措施的持续改进等等。接着，李主任以举例的方式，对检验申请单是否合适、如何进行检查，标本的采集、运送、保存和检测前准备，试剂方法的性能验证，室内质量控制，结果的报告与解释等方面介绍了质量控制的若干环节。
采编：方研
审校：姜妤
