细胞离心涂片机在体液细胞学检验中的应用

作者:郑磊 闫立志
作者单位:南方医科大学南方医院检验科 2022-10-08

闫立志,副主任检验技师、执业医师,医学硕士。现工作于南方医科大学南方医院检验医学科。

从事细胞形态学检验十余年,擅长外周血、骨髓、胸腹水细胞学、支气管肺泡灌洗液细胞学、尿液有形成分分析及尿液脱落细胞学检查。


中国中西医结合学会检验医学专业委员会委员,中国医学装备协会检验分会委员,白求恩精神研究会检验分会委员,国家卫生健康委能力建设和继续教育中心检验医学专业2021年第一期受聘教师。出版专著《尿液有形成分图谱新解及病例分析》,主编《体液细胞学图谱》、《尿液有形成分图谱精选》、《临床体液细胞AIE荧光染色图谱》,参编10余部形态学著作。执笔2020版《浆膜腔积液、脑脊液及肺泡灌洗液细胞形态学检验专家共识》。



细胞离心涂片机采用微电脑控制,可预选转速、时间、离心力,液晶显示,操作简便,内置自动平衡装置,预警报警功能,适用于宫颈细胞薄层制片、脑脊液、胸腔积液等细胞薄层制片。


一、细胞离心涂片机制片适用范围


1. 脑脊液细胞学检查标本制片。

2. 细胞数量少的浆膜腔积液标本制片。

3. 无黏液或经过预处理的痰液和支气管肺泡灌洗液等标本制

片。

4. 有形成分较少的尿液标本制片。

5. 其它无黏液的体液标本均可使用细胞离心涂片机制片。


二、细胞离心涂片机制片的优点


1. 细胞收集的效果较好:该种方法特别适用于细胞等有形成分少的标本,避免漏检一些有诊断价值的细胞。


2. 细胞分布比较集中:使用传统的推片法制作的涂片,涂片面积较大,如果浏览全片需要耗费很多时间;使用细胞离心涂片机制片,可以将细胞集中在直径在1cm左右的范围内,有利于镜检。


3. 细胞结构清晰:由于离心力的作用,使得细胞黏附并紧密贴合在玻片上,染色后的细胞结构清晰。


4. 细胞完整,不易形成涂抹细胞:体液细胞制片常选用推片法,使用该种方法,涂片尾部的细胞容易破碎或形成涂抹细胞;使用细胞离心涂片机制片,在适当的离心速度下,细胞结构比较完整。


图1. 细胞离心涂片机


三、离心速度对制片的影响


离心速度是决定制片质量的关键因素,速度过高或过低,制片均不能达到理想的效果,所以根据标本类型选择合理的离心速度。


以尿液标本为例:图2是离心速度在1000rpm制片后细胞形态,有核细胞数量明显增多,细胞成堆或成片分布,细胞破碎,结构不完整,胞质外溢,部分细胞核碎裂,结构破坏的细胞不易鉴别细胞的种类。


当离心速度在600~800rpm时(图3),观察细胞形态,视野中的细胞结构完整,可见体积巨大的异型细胞,该类细胞单个散在或成片分布,胞质丰富、强嗜碱性,胞核大、畸形,染色质厚重、致密,核仁大而明显,依据细胞形态特征,可以诊断为肿瘤细胞;背景中可见大量中性粒细胞,细胞结构清晰。


由于大部分尿液标本离心后沉渣较少,所以选择使用细胞离心涂片机制片时,离心速度在600~800rpm较为适宜(图4),制片效果较好,细胞比较集中,有利于镜检。针对其他体液标本,在使用细胞离心涂片机制片时,同样需要注意离心速度,离心速度过低,细胞结构不清晰;离心速度过高,细胞容易破坏。


图2. 离心速度在1000rpm制作的涂片


图3. 离心速度在800rpm制作的涂片


图4. 离心速度在600rpm制作的涂片


四、其他影响因素


1. 合适的标本浓度:细胞离心涂片机制片特别适用于细胞等有形成分少的标本,但标本浓度过高或有形成分较多时,制作的涂片,细胞相互堆叠、结构不清,不利于染色和镜检。


2. 避免交叉污染:建议制片使用一次性耗材;若无一次性耗材,应对细胞收集器进行清洁和消毒。


3. 严格执行离心机操作规程:各种细胞离心涂片机原理和使用方法各不相同,制片时按照仪器SOP进行操作,保证制片质量