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临床实验室

病原体核酸即时检测质量管理要求专家共识
2021年，新型冠状病毒肺炎疫情仍然在全球范围起伏跌宕。在我国科学防控、精准施策的公共卫生体系运行下，实现了疫情管控和复工复产的有序和共赢。其中，新型冠状病毒核酸检测作为疫情防控的第一防线，发挥了巨大作用。在发热门诊、急诊手术等场景下，要求核酸检测随到随做、快速报告，新型冠状病毒核酸即时检测（POCT）技术应运而生，迅速在各级医疗机构广泛开展，与常规聚合酶链反应（PCR）批测试互补，构建了保障医疗安全和提升优质服务的实验诊断平台。但鉴于分子诊断的复杂性和病原微生物的生物安全要求，病原体核酸POCT与传统基
上海市医学会分子诊断专科分会上海市医学会检验医学专科分会上海市微生物学会临床微生物学专业委员会上海市临床检验中心 2022-03-30
POCT分子诊断新趋势：多重PCR试纸层析检测新技术
基于核酸扩增（PCR）的分子诊断技术是通过引物介导特异性扩增目的基因，以检测内源性（遗传或变异）或外源性（病原体）目的基因的存在与否，进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。它一经问世就作为一种快速、灵敏、特异的检测新技术手段，迅速而广泛地应用于传染病的诊断、血筛和肿瘤早期辅助诊断，例如，肿瘤的分子分型、遗传病的诊断、产前诊断和组织分型等诸多诊疗领域中。
易浔飞 2022-03-30
核酸扩增和检测新技术在分子诊断中的应用
分子诊断是指用分子生物学技术检测核酸分子，以判断遗传物质结构或表达水平的变化而做出的诊断，目前主要用于遗传病、传染性疾病、肿瘤等疾病的检测与诊断。核酸扩增和检测技术是分子诊断中最重要的检测技术。在新冠疫情中，核酸扩增技术一直是世界上应对疫情大流行的主要依赖技术。本文着重介绍了分子诊断的核酸扩增和检测相关技术如数字PCR技术、电化学PCR技术、恒温扩增技术、CRISPR/Cas13a技术、微流控技术等技术方法的原理及其应用研究进展。
陈文铎王先磊周林福 2022-03-30
分子生物学诊断技术在急性白血病诊断与治疗中的应用
急性白血病的诊断分型、治疗选择及预后判断已经进入了分子生物学时代，新的分子生物学技术应用使我们对急性白血病有更全面和更深入的了解，为急性白血病的精准诊治提供了技术支撑。本文系统介绍聚合酶链式反应（PCR）、基因测序、荧光原位杂交等分子生物学技术在急性白血病诊治中的应用进展，其中重点描述微滴式数字PCR技术、二代测序技术（包括转录组测序、外显子组测序、全基因组测序、单细胞测序）的优缺点和应用范围，以期促进临床工作者进一步了解新型分子生物学技术，进而合理高效地应用于急性白血病诊治。
张翔黄建松金洁 2022-03-30
数字PCR在血流感染病原学诊断中的应用
血流感染是细菌、真菌等病原微生物入侵血液所致的一种感染性疾病，部分可发展为脓毒症，是ICU危重疾病之一[1-3]。全世界每年有4700至5000万例脓毒症患者，至少有1100万例死亡，占每年全球死亡人数的19.7%，是住院患者死亡的主要原因之一[4-6]。近年来，血流感染和脓毒症的发生率迅速上升[7, 8]，医疗成本居高不下，2019年美国在脓毒症相关的医疗花费超过620亿美元[6]。早期诊断和针对性治疗可极大降低血流感染和脓毒症患者的死亡率[10-12]。据估算，血流感染每延迟治疗1个小时，患者死亡率增
余皓宋光运夏江 2022-03-30
多重荧光PCR毛细电泳片段分析技术研究与临床应用
21世纪，全球仍然面临着重大公共卫生威胁，尤其在新型冠状病毒流行背景下，病原体的混合感染会导致高发病率和高死亡率，危害程度严重，控制难度极大。因此对一系列致病微生物进行鉴别诊断，是对传染性疾病疫情防御和精准治疗工作的前提。本文介绍一种新的多重荧光PCR毛细电泳技术及其应用情况。
崔贤艳吴勇 2022-03-30
宏基因组高通量测序技术临床转化与平台建设
在临床感染病原学诊断过程中，时常会面对一些不明原因感染或受限于检测技术灵敏度无法获得准确结果的困境。临床迫切需要突破性的病原体诊断方法，直接、快速、准确的从临床样本鉴定感染病原体，进而指导临床治疗。随着测序技术的飞速发展以及成本的快速下降，宏基因组高通量测序技术（metagenomic next generation sequencing，mNGS）的临床应用为解决上述问题带来了曙光[1, 2]。本文从mNGS技术原理与主要流程、临床转化与应用进展、数据库与分析系统构建要点和本地化实验室平台建设四个方面作
苟雪静杨北成冷眉曹承华张舟白杨郭信麟李永军 2022-03-30
微滴式数字PCR技术在甲型H1N1流感病毒耐药基因H275Y突变检测中的应用
目的建立起一套可用于检测临床甲型H1N1流感病毒样本H275Y突变的微滴式数字PCR（dd-PCR）检测方法。方法设计甲型H1N1流感病毒耐药基因H275Y突变特异性的引物及TaqMan探针，建立和优化实时荧光PCR反应体系及dd-PCR反应体系，评价其灵敏度、特异性等，并利用实验室保存的甲型H1N1流感病毒临床样本（4例H275Y基因突变标本和4例H275未突变标本）对该方法进行验证。结果建立的甲型H1N1流感病毒耐药基因H275Y突变dd-PCR检测体系具有与qRT-PCR相当的灵敏度和特异性，
谢国良 2022-03-30
CRISPR/Cas基因编辑技术在病原诊断中的应用
基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白（CRISPR/Cas）系统构建的基因编辑技术，凭借其简单、高效的特点，目前已广泛应用于生物、医学等多个研究领域。特别是近几年，CRISPR/Cas系统已被开发为一种快速、超敏、高特异性的分子检测工具，目前在病原体核酸检测、基因多样性如单核苷酸多态性与DNA甲基化、耐药性分析、疾病相关基因的筛查等领域展现了巨大的应用前景。本文就CRISPR/Cas系统在分子诊断的应用进行总结，并对其应用前景进行展望，以期为相关领域科研工作提供参考。
陈威震 2022-03-30
微流控技术在病原诊断中的应用
微流控分子诊断技术是通过将样本处理，核酸扩增，结果判断集成到一台仪器或芯片上，实现从“样本-结果”的全流程自动化操作。在病原的检测上，成熟的微流控检测设备不仅可以最大限度的缩短检测时间，降低对专业技术人员的要求，避免环境污染以及操作人员感染，因此在即时检验（point-of-care testing，POCT）领域的应用前景广阔。本文综述了现阶段不同微流控分子检测仪器的技术原理，包括现有的商业化微流控检测仪器和实验室阶段的研究进展。希望能够加深对于微流控病原菌分子检测技术的了解，并对未来微流控技术的发展提
李超群袁满王永成 2022-03-30
分子诊断POCT系统和相关技术开发进展与挑战
新型冠状病毒肺炎（COVID-19）大流行引发了临床检测实验室对分子诊断前所未有的关注以及公众对核酸检测的关切。从获得新冠病毒基因组序列后数天内制造商完成基于RT-PCR技术的核酸检测试剂盒的研发，至数十天内由监管部门在紧急授权的程序框架下完成产品的审批上市，分子诊断技术及相关产品展示了其在应对大规模流行病的防控中的重大意义。事实上，目前基于PCR的实验室核酸检测手段已经成为全球范围检测新型冠状病毒的“金标准”。伴随着新型冠状病毒疫情的防控工作的开展，国内临床上出现了一类新的新型冠状病毒核酸检测方法-分子
章洪建刘佳 2022-03-30
四联心肌损伤标志物在急诊胸痛快速鉴别诊断中的临床应用价值
近年来，随着我国人口老龄化加快，急性心血管疾病发病率增加，因急性胸痛就诊的患者人数也逐年递增。急性胸痛临床表现不一、病情变化迅速、危险性差异悬殊、预后与疼痛程度不完全相关、救治时间依赖性强。随着胸痛中心建设的推广，我国胸痛诊疗日趋规范，但我国幅员辽阔、急诊诊疗能力存在差异，误诊、漏诊仍时有发生。因此，作为急性胸痛救治的第一站，院前急救和急诊科需快速评估、准确鉴别并科学处理，进而高效救治、合理分流胸痛患者。
上海艾瑞德生物科技有限公司学术部 2022-03-26
临床实验室数字化创新与数字化转型
2021年4月，国家卫生健康委统计信息中心印发了《全民健康信息化调查报告（2021）》。调查报告分析了全民健康信息化发展基础、地区发展差异、资金投入情况，对当前的平台建设、数据资源、基础设施等进行了梳理。2021年11月，国家工信部印发了《“十四五”大数据产业发展规划》，进一步提出“十四五”时期，聚焦产业数字化和数字产业化，更是明确数据上升为新的生产要素，培育大数据交易市场。
西门子医学诊断产品（上海）有限公司市场部 2022-03-26
宏基因组高通量测序技术临床应用中面临的问题与思考
宏基因组高通量测序技术（metagenomic next-generation sequencing，mNGS）作为一种新的分子诊断方法，已经在临床感染性疾病诊断中得到了较为广泛的应用，为常规方法难以诊断的感染提供了新的思路。但该技术目前处在临床转化的早期阶段，尚面临不少的方法学和临床问题。本文首先概述了mNGS的临床应用现状，并重点对mNGS的临床应用中面临的识别来自背景微生物和人源DNA的干扰、建立结果解读与报告标准、开展性能确认活动、开展室内质控和参加室间质量评价等关键问题进行讨论和思考，期望研究人
韩东升 2022-03-25
分子诊断技术在遗传性疾病诊断与应用研究前景
遗传性疾病指遗传物质改变导致的疾病，具有病种多、临床表现复杂，治疗方法相对有限等特点，遗传性疾病的预防、诊断和治疗对于提高人口素质至关重要。分子诊断技术的发展、推广和规范化管理大力推动了遗传性疾病的诊断、机制研究和治疗探索。本文基于分子诊断技术在遗传性疾病中的应用现状，重点介绍分子诊断新技术的发展趋势和应用价值，以期加深临床对分子诊断技术的认识，从而合理应用于遗传性疾病的诊断。
张仪王剑 2022-03-25
数字PCR在产前诊断中的应用价值与发展趋势
数字PCR技术是一种新颖、灵敏、准确、多元的定量策略，可以在复杂的临床样本中检测出如细胞游离DNA等数量稀少的目标核酸，是传统方法的一种高灵敏度和高准确度的替代方法，特别是在产前诊断领域中，在无创性产前诊断、胎儿非整倍体疾病、单基因疾病、X连锁遗传疾病等诸多方面具有广阔的应用前景。本文就数字PCR的原理、分类、产前诊断领域中的应用及其前景进行综述。
张彤孙娅男魏凤香 2022-03-25
分子诊断床旁检测技术在感染性疾病中的临床应用
近年来，分子床旁检测（point-of-care testing，POCT）技术发展迅速，其在实现整合一体化检测的同时，具有小型、简便、快速的特点，在感染性疾病快速诊断等方面具有广阔的临床应用前景。本文就POCT的新进展以及主要挑战、机遇和未来趋势予以概述，重点介绍了国内外已上市或正在上市的分子POCT诊断仪器特性、应用领域及应用展望。随着技术的发展和持续优化，分子床旁检测技术在保证高性能的同时，提高质量控制并降低成本，将有利于更广泛的应用。
吴小翠马坚汤一苇余方友 2022-03-25
POCT分子诊断检测技术在感染性疾病诊断中的应用与临床应用范围
即时检测（point-of-care testing，POCT）是在患者所在地或其附近进行的、可便捷、快速地获得检测结果的检测方法。相比于传统的检测方法，其在样本周转时间方面有较大的优势，特别适用于影响临床决策的诊断指标和监测指标。同时POCT检测对于人员的要求一般较低，通常经过简单培训或不需经过培训仅阅读了说明书的人员即可进行检测[1]。POCT目前已经被广泛应用于生化、免疫指标的检测，例如末梢血血糖检测和HIV抗体检测，前者用于糖尿病患者血糖管理，后者应用于HIV感染者筛查。
张嘉威欧启水 2022-03-25
宏基因组高通量测序技术在血流感染领域的临床应用与质量控制问题
血流感染是临床常见感染之一，尽早发现和鉴别致病性微生物对于尽快启动或调整抗生素治疗方案至关重要。血液样本作为一种易获取、非侵入性样本，其中含有血流感染及局部病灶感染相关的病原微生物及其细胞游离脱氧核糖核酸，是临床感染重要的样本类型之一。相比于传统检测方法，近年来快速发展的宏基因组高通量测序技术具有检测周期短、灵敏度高及病原谱广等优势，在血流感染检测领域正得到越来越广泛的关注和应用。本文就宏基因组高通量测序技术在血流感染领域的临床应用现状及发展进行综述。
刘东来许四宏 2022-03-25
RNA实时荧光恒温扩增技术的临床应用与应用前景
近年来，核酸扩增检测（nucleic acid amplification testing，NAAT）技术在临床病原体检测领域的应用越来越广泛，相对于传统的培养检测方法，其缩短了检测周期、具有高灵敏度和准确度，已成为病原体检测的有效工具[1]。NAAT技术可分为DNA扩增技术和RNA扩增技术两大类。聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）属于DNA扩增技术，RNA实时荧光恒温扩增技术（simultaneous amplification and testing，SAT）
孟欢王雅杰 2022-03-25

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