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临床实验室

POCT分子诊断新趋势：多重PCR试纸层析检测新技术
基于核酸扩增（PCR）的分子诊断技术是通过引物介导特异性扩增目的基因，以检测内源性（遗传或变异）或外源性（病原体）目的基因的存在与否，进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。它一经问世就作为一种快速、灵敏、特异的检测新技术手段，迅速而广泛地应用于传染病的诊断、血筛和肿瘤早期辅助诊断，例如，肿瘤的分子分型、遗传病的诊断、产前诊断和组织分型等诸多诊疗领域中。
易浔飞 2022-03-30
核酸扩增和检测新技术在分子诊断中的应用
分子诊断是指用分子生物学技术检测核酸分子，以判断遗传物质结构或表达水平的变化而做出的诊断，目前主要用于遗传病、传染性疾病、肿瘤等疾病的检测与诊断。核酸扩增和检测技术是分子诊断中最重要的检测技术。在新冠疫情中，核酸扩增技术一直是世界上应对疫情大流行的主要依赖技术。本文着重介绍了分子诊断的核酸扩增和检测相关技术如数字PCR技术、电化学PCR技术、恒温扩增技术、CRISPR/Cas13a技术、微流控技术等技术方法的原理及其应用研究进展。
陈文铎王先磊周林福 2022-03-30
宏基因组高通量测序技术临床转化与平台建设
在临床感染病原学诊断过程中，时常会面对一些不明原因感染或受限于检测技术灵敏度无法获得准确结果的困境。临床迫切需要突破性的病原体诊断方法，直接、快速、准确的从临床样本鉴定感染病原体，进而指导临床治疗。随着测序技术的飞速发展以及成本的快速下降，宏基因组高通量测序技术（metagenomic next generation sequencing，mNGS）的临床应用为解决上述问题带来了曙光[1, 2]。本文从mNGS技术原理与主要流程、临床转化与应用进展、数据库与分析系统构建要点和本地化实验室平台建设四个方面作
苟雪静杨北成冷眉曹承华张舟白杨郭信麟李永军 2022-03-30
微滴式数字PCR技术在甲型H1N1流感病毒耐药基因H275Y突变检测中的应用
目的建立起一套可用于检测临床甲型H1N1流感病毒样本H275Y突变的微滴式数字PCR（dd-PCR）检测方法。方法设计甲型H1N1流感病毒耐药基因H275Y突变特异性的引物及TaqMan探针，建立和优化实时荧光PCR反应体系及dd-PCR反应体系，评价其灵敏度、特异性等，并利用实验室保存的甲型H1N1流感病毒临床样本（4例H275Y基因突变标本和4例H275未突变标本）对该方法进行验证。结果建立的甲型H1N1流感病毒耐药基因H275Y突变dd-PCR检测体系具有与qRT-PCR相当的灵敏度和特异性，
谢国良 2022-03-30
CRISPR/Cas基因编辑技术在病原诊断中的应用
基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白（CRISPR/Cas）系统构建的基因编辑技术，凭借其简单、高效的特点，目前已广泛应用于生物、医学等多个研究领域。特别是近几年，CRISPR/Cas系统已被开发为一种快速、超敏、高特异性的分子检测工具，目前在病原体核酸检测、基因多样性如单核苷酸多态性与DNA甲基化、耐药性分析、疾病相关基因的筛查等领域展现了巨大的应用前景。本文就CRISPR/Cas系统在分子诊断的应用进行总结，并对其应用前景进行展望，以期为相关领域科研工作提供参考。
陈威震 2022-03-30
微流控技术在病原诊断中的应用
微流控分子诊断技术是通过将样本处理，核酸扩增，结果判断集成到一台仪器或芯片上，实现从“样本-结果”的全流程自动化操作。在病原的检测上，成熟的微流控检测设备不仅可以最大限度的缩短检测时间，降低对专业技术人员的要求，避免环境污染以及操作人员感染，因此在即时检验（point-of-care testing，POCT）领域的应用前景广阔。本文综述了现阶段不同微流控分子检测仪器的技术原理，包括现有的商业化微流控检测仪器和实验室阶段的研究进展。希望能够加深对于微流控病原菌分子检测技术的了解，并对未来微流控技术的发展提
李超群袁满王永成 2022-03-30
分子诊断POCT系统和相关技术开发进展与挑战
新型冠状病毒肺炎（COVID-19）大流行引发了临床检测实验室对分子诊断前所未有的关注以及公众对核酸检测的关切。从获得新冠病毒基因组序列后数天内制造商完成基于RT-PCR技术的核酸检测试剂盒的研发，至数十天内由监管部门在紧急授权的程序框架下完成产品的审批上市，分子诊断技术及相关产品展示了其在应对大规模流行病的防控中的重大意义。事实上，目前基于PCR的实验室核酸检测手段已经成为全球范围检测新型冠状病毒的“金标准”。伴随着新型冠状病毒疫情的防控工作的开展，国内临床上出现了一类新的新型冠状病毒核酸检测方法-分子
章洪建刘佳 2022-03-30
数字PCR在产前诊断中的应用价值与发展趋势
数字PCR技术是一种新颖、灵敏、准确、多元的定量策略，可以在复杂的临床样本中检测出如细胞游离DNA等数量稀少的目标核酸，是传统方法的一种高灵敏度和高准确度的替代方法，特别是在产前诊断领域中，在无创性产前诊断、胎儿非整倍体疾病、单基因疾病、X连锁遗传疾病等诸多方面具有广阔的应用前景。本文就数字PCR的原理、分类、产前诊断领域中的应用及其前景进行综述。
张彤孙娅男魏凤香 2022-03-25
分子诊断床旁检测技术在感染性疾病中的临床应用
近年来，分子床旁检测（point-of-care testing，POCT）技术发展迅速，其在实现整合一体化检测的同时，具有小型、简便、快速的特点，在感染性疾病快速诊断等方面具有广阔的临床应用前景。本文就POCT的新进展以及主要挑战、机遇和未来趋势予以概述，重点介绍了国内外已上市或正在上市的分子POCT诊断仪器特性、应用领域及应用展望。随着技术的发展和持续优化，分子床旁检测技术在保证高性能的同时，提高质量控制并降低成本，将有利于更广泛的应用。
吴小翠马坚汤一苇余方友 2022-03-25
POCT分子诊断检测技术在感染性疾病诊断中的应用与临床应用范围
即时检测（point-of-care testing，POCT）是在患者所在地或其附近进行的、可便捷、快速地获得检测结果的检测方法。相比于传统的检测方法，其在样本周转时间方面有较大的优势，特别适用于影响临床决策的诊断指标和监测指标。同时POCT检测对于人员的要求一般较低，通常经过简单培训或不需经过培训仅阅读了说明书的人员即可进行检测[1]。POCT目前已经被广泛应用于生化、免疫指标的检测，例如末梢血血糖检测和HIV抗体检测，前者用于糖尿病患者血糖管理，后者应用于HIV感染者筛查。
张嘉威欧启水 2022-03-25
宏基因组高通量测序技术在血流感染领域的临床应用与质量控制问题
血流感染是临床常见感染之一，尽早发现和鉴别致病性微生物对于尽快启动或调整抗生素治疗方案至关重要。血液样本作为一种易获取、非侵入性样本，其中含有血流感染及局部病灶感染相关的病原微生物及其细胞游离脱氧核糖核酸，是临床感染重要的样本类型之一。相比于传统检测方法，近年来快速发展的宏基因组高通量测序技术具有检测周期短、灵敏度高及病原谱广等优势，在血流感染检测领域正得到越来越广泛的关注和应用。本文就宏基因组高通量测序技术在血流感染领域的临床应用现状及发展进行综述。
刘东来许四宏 2022-03-25
RNA实时荧光恒温扩增技术的临床应用与应用前景
近年来，核酸扩增检测（nucleic acid amplification testing，NAAT）技术在临床病原体检测领域的应用越来越广泛，相对于传统的培养检测方法，其缩短了检测周期、具有高灵敏度和准确度，已成为病原体检测的有效工具[1]。NAAT技术可分为DNA扩增技术和RNA扩增技术两大类。聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）属于DNA扩增技术，RNA实时荧光恒温扩增技术（simultaneous amplification and testing，SAT）
孟欢王雅杰 2022-03-25
核酸等温扩增技术的应用现状与思考
目前, 传统的聚合酶链式反应, 简称PCR技术, 因其灵敏度高、特异性强和稳定性好被认为是病毒核酸检测的首选方法。PCR技术是一个热循环的过程, 包括高温变性、退火和延伸3个环节。通常在35个循环之后, 微量的DNA模板即被特异性地扩增到可以被仪器检测到的数量，但整个扩增检测时间较长，需要核酸扩增仪作为辅助工具, 因此PCR反应始终受到电力、成本以及空间等因素的制约, 难以实现对病原的现场快速检测。
马学军 2022-03-25
临床分子诊断技术在疾病诊疗中的应用价值与相关问题
分子诊断技术是指以DNA或RNA为诊断材料，利用核酸扩增等分子生物学手段，检测靶标基因的存在、缺陷或表达异常，从而对疾病作出诊断的技术。目前分子诊断技术正处于高速发展时期，各类创新技术不断取得突破，除实时荧光PCR技术外，近年来分子诊断领域不断发展新的技术方法，应用范围也在不断拓展。尤其是新冠疫情以来，在感染性疾病病原分子诊断细分领域，国内外的体外诊断技术研发机构和企业各显神通，各种新型核酸检测技术不断涌现。以新型冠状病毒核酸检测试剂的临床应用为例，目前获得国家食品药品监督管理局第三类医疗器械注册证的核酸
陈瑜 2022-03-25
临床微生物快速药敏检测技术分析仪临床应用
自2015年以来，每年11月的第三周，是世界卫生组织（WHO）确定的“世界提高抗生素认识周”，国家卫生健康委医政司医管局每年开展“提高抗微生物药物认识周”活动，通过广泛宣传抗生素合理使用提高公众对微生物耐药的危机意识。对于合理用药，抗生素敏感性测试相关的检测手段和设备是必不可少的一环，相比现在的18-24h药敏检测技术，鑫科生物一款2小时获得药敏检测结果的个体细胞技术快速药敏分析仪有望在2022年正式进入市场。
崔璟 2022-02-24
老年呼吸系统真菌病早期精准诊断技术研究与临床应用
随着广谱抗菌药物、免疫抑制剂、抗肿瘤药物的广泛应用以及器官移植、介入医疗等技术的普遍推广，呼吸系统真菌感染越来越常见。由于老年人生理机能及免疫功能衰退，加之全球进入老龄化社会，老年群体越来越大，老年呼吸系统真菌感染发病率越来越高。老年人多种疾病共存导致老年呼吸系统真菌病容易出现漏诊、误诊，延误治疗，严重影响老年人身体健康。因此，亟需提高老年呼吸系统真菌病的诊疗能力。目前，开发了多种针对真菌抗原抗体的检测方法，包括G试验、曲霉GM抗原试验、曲霉IgG抗体检测、曲霉IgE抗体检测及隐球菌荚膜多糖抗原检测GXM
张喜庆吴秀祯周泽奇 2022-02-24
真菌药物敏感试验方法学特点与规范化应用
侵袭性真菌感染和耐药增多导致感染复发或治疗失败，临床对真菌药敏试验的需求日益增加，目前大多数实验室未开展或不知如何进行标准化的真菌药敏实验。因此，本篇将结合美国临床和实验室标准化协会（CLSI）和欧洲抗菌药物敏感试验委员会（EUCAST）发布的真菌药物敏感试验的相关参考文件、参考方法、商品化方法和其它检测方法，阐述真菌药物敏感试验方法的特点和标准化操作，为临床真菌药物敏感试验的规范化开展提供参考。
袁凯旋叶龙陈晓丽陈卓曦赵云虎 2022-02-24
两中心微量肉汤稀释法检测苛养菌体外药敏结果的差异性分析
目的比较两中心微量肉汤稀释法检测苛养菌体外药物敏感性试验结果的不一致性。方法本试验选取两中心分别对相同菌株（流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、产单核细胞李斯特菌各30株）进行微量肉汤稀释法体外药物敏感性试验，比较其结果的基本一致率（EA%）、分类一致率（CA%）、极大错误率（VME%）、大错误率（ME%）及小错误率（MIE%）。结果两中心流感嗜血杆菌体外药敏试验结果有3种抗菌药物CA%＜90%，5种抗菌药物VME%＞3%；卡他莫拉菌体外药物敏感性试验结果有1种抗菌药物CA%＜90%，所有抗菌药物VME%＜3
李进张戈王瞳刘亚丽 2022-02-24
碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌对头孢他啶阿维巴坦的耐药现状与最新检
近年来临床上碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌（carbapenem-resistant Enterobacterales，CRE）的检出率不断升高，产碳青霉烯酶是其主要耐药机制。产碳青霉烯酶CRE在全球范围内广泛扩散，对于此类多重耐药株，临床有效治疗药物非常有限，常面临无药可用的困境。头孢他啶-阿维巴坦是治疗此类感染最有效的抗菌药物之一，但CRE对头孢他啶-阿维巴坦耐药已有临床报道。现对其耐药现状及检测技术予以概述，为临床院感控制及新药研发提供理论依据。
杨冬晨杜艳 2022-02-24
Xpert Carba-R检测技术在肠杆菌科细菌碳青霉烯酶基
抗生素的滥用是细菌耐药日趋严峻的重要因素，已成为全球重大的公共卫生问题。碳青霉烯类抗生素多用于治疗多重耐药菌的感染，随着碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, CRE）的检测率逐年上升，快速准确检测CRE耐药基因对诊断CRE感染及治疗具有积极的作用。Xpert Carba-R基于荧光PCR技术对碳青霉烯酶类基因家族KPC、NDM、VIM、IMP和OXA-48进行快速检测，优于传统的鉴定技术，具有较高的检测效率。本文通过回顾和归纳Xper
蓝淇文陈楚茂贺湘萍陈浩楷郭旭光 2022-02-24

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